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匿名

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1楼 2012-04-05 15:21:28
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雷杨琴

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
阴性出现条带有可能有几个方面的问题：（1）纯水，需要去离子水再灭菌；（2）PCR试剂，引物、酶等用久了都可能有污染；（3）枪头，最好戴着手套装枪头，再灭菌。最好加样在超净工作台上进行。每一步都要注意，多试几次就好了。
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2楼2012-04-05 15:34:50
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匿名

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3楼2012-04-05 16:11:43
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vszhang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我觉得枪、工作台、还有枪头盒污染的可能性更大。
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启蒙的恩师是‘神拳泰斗’刘虎刘老爷子，然后是‘无敌刀’杨斌杨二爷子、‘一枪刺九龙’赵广赵老师、‘神刀铁胳臂’胡得杨胡大爷
4楼2012-04-05 20:39:29
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匿名

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5楼2012-04-05 22:41:51
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cmtoon

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by baiyal2000 at 2012-04-05 22:41:51:
打错了一个字，我是想问，水有没有专门的公司再卖，还有depc水能做普通PCR吗

一般做PCR的水在买taq酶都会有水配套的啊。想我现在用的fermentas公司的2×taq mix就是有水配套的。
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6楼2012-04-06 00:22:01
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馋猫

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
全部换就是了，这个也没什么好找的
使用的枪基本不在考虑范围，除非你们实验室太混乱了
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7楼2012-04-06 11:15:04
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舍我其谁6107

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by baiyal2000 at 2012-04-05 16:11:43:
水又没有买公司的，还有如果枪污染了该怎么办

如果是枪污染的话，移液器是全支灭或半只灭的话可以通过高温灭菌处理，不能灭的话，可以通过75%的酒精棉擦拭枪身，在枪头上端塞些脱脂棉后灭菌使用
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8楼2012-04-06 11:19:37
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mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不差钱的话，全部用带滤芯的枪头。

移液器换用全支灭菌的移液器，eppendorf的就很好用。

水用公司送来的水。

这些都是耗材，比起一次次的实验失败的浪费，反而就不觉得贵了。

培养一个良好的实验习惯，如果做DNA就这样的话，等你做RNA就该哭了，啥都做不出来。
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环境卫生、微生物学、卫生应急
9楼2012-04-16 11:09:15
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ciqql

新虫 (正式写手)
PCR是一个简单的实验，没有大家想象的那么复杂，水、枪头等污染可能性都很小，DEPC水是去RNA酶的，用于RNA操作，普通PCR压根不用DEPC水的，普通灭菌水就足够了。移液器一般也不太容易污染，所以你应该查查一些别的可能原因，比如气溶胶的问题等等。或者把你实验室环境、条件等大致所一下，大家一起和你去判断。谢谢！
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10楼2012-04-17 10:25:21
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