24小时热门版块排行榜    

查看: 1743  |  回复: 4

xiaomuxiaoma

铁虫 (小有名气)

[求助] pcr污染怎么办?

这样pcr出来的结果是试剂污染了吗?应该怎样排查是哪种试剂污染了啊?

原来的pcr体系受到了污染,不加模板也能扩出来,先设计一实验,想确定是那种成分受到了污染。
2-6号为分别使用原来的buffer,Mg2+,dNTP,primer1,primer2中的一种,其他的四种成分都用新的,酶都还是用原来的,体系中不加模板,扩出的结果
7号为加了模板,扩出来正常,
8号为用购买的pcr mix(buffer,mg2+,dNTP,Taq预混好)加primer1,primer2,不加模板扩出来的。
目标片段283bp
marker条带分别为1200,900,750,600,450,300,150
H2O也是另换的一瓶水。
各位帮忙分析一下,这可能是什么被污染了?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

太极拳

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-04-13 18:37:57
个人认为是水有问题,即便是新引物,也是用水稀释后得到的。或是周围空气中有此基因。可以换其他实验室的水试试
2楼2012-04-13 15:33:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zgb1982

木虫 (正式写手)

我这两天也遇到PCR污染的问题,也没找到具体的污染源,不过觉得应该是引物的问题,也是用的商品化的PCRMIX,今天不加模板扩了五个,四个都有条带,有一个还特别亮,有一个没条带,很是奇怪.
3楼2012-04-13 15:39:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-13 18:38:21
xiaomuxiaoma: 金币+1, ★有帮助 2012-04-17 10:50:07
我实验室也遇到这种情况,也像你一样把BUffer,酶,水都换了发现没解决,最后发现是枪的问题,建议你去其他实验室(不做你那基因的),用人家的所有东西,别用自己的,估计就OK了。移液枪吸液时注意不要让液体误吸到枪体里,能清理的话隔一段时间用酒精洗一下。实验室做长了这种实验也会形成气溶胶,说不定就会跑到你的PCR体系里,建议这种易污染的实验在无菌操作台里操作。
希望能帮到你,祝实验顺利!
hehe
4楼2012-04-13 17:06:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

polo_lai

新虫 (初入文坛)

气溶胶污染应该7号也能出来150bp以下的片段,我感觉是Primer浓度高了?!~要不就电压的问题或胶不均匀!~
将爱进行到底
5楼2017-11-21 12:02:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xiaomuxiaoma 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:42 by ZvyPK8n6Nfki
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:34 by ZvyPK8n6Nfki
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:28 by ZvyPK8n6Nfki
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:18 by ZvyPK8n6Nfki
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:46 by b8fCuTHqckEt
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 4/200 2026-09-28 23:19 by b8fCuTHqckEt
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:12 by b8fCuTHqckEt
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-28 22:45 by ez6fGg9abYaj
[有机交流] 同一个分子,一条来自文献,一条来自AI——不告诉你答案,你会选哪条? +3 tianxiaoxian 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:44 by tianxiaoxian
[找工作] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-28 22:32 by ez6fGg9abYaj
[公派出国] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:28 by ez6fGg9abYaj
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 3/150 2026-09-28 22:21 by ez6fGg9abYaj
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:15 by ez6fGg9abYaj
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-28 19:08 by 9lS3ad5oOymn
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 18:51 by 9lS3ad5oOymn
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 17:30 by ZYXdhzDAy9ZX
[教师之家] 某top大学教授说“能够在市场中兑现的能力才是真能力”无比同意! +7 zju2000 2026-09-26 8/400 2026-09-28 16:42 by beefly
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-28 15:32 by ZYXdhzDAy9ZX
信息提示
请填处理意见