24小时热门版块排行榜    

查看: 1367  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xiaomuxiaoma

铁虫 (小有名气)

[求助] pcr污染怎么办?

这样pcr出来的结果是试剂污染了吗?应该怎样排查是哪种试剂污染了啊?

原来的pcr体系受到了污染,不加模板也能扩出来,先设计一实验,想确定是那种成分受到了污染。
2-6号为分别使用原来的buffer,Mg2+,dNTP,primer1,primer2中的一种,其他的四种成分都用新的,酶都还是用原来的,体系中不加模板,扩出的结果
7号为加了模板,扩出来正常,
8号为用购买的pcr mix(buffer,mg2+,dNTP,Taq预混好)加primer1,primer2,不加模板扩出来的。
目标片段283bp
marker条带分别为1200,900,750,600,450,300,150
H2O也是另换的一瓶水。
各位帮忙分析一下,这可能是什么被污染了?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

polo_lai

新虫 (初入文坛)

气溶胶污染应该7号也能出来150bp以下的片段,我感觉是Primer浓度高了?!~要不就电压的问题或胶不均匀!~
将爱进行到底
5楼2017-11-21 12:02:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

太极拳

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-04-13 18:37:57
个人认为是水有问题,即便是新引物,也是用水稀释后得到的。或是周围空气中有此基因。可以换其他实验室的水试试
2楼2012-04-13 15:33:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zgb1982

木虫 (正式写手)

我这两天也遇到PCR污染的问题,也没找到具体的污染源,不过觉得应该是引物的问题,也是用的商品化的PCRMIX,今天不加模板扩了五个,四个都有条带,有一个还特别亮,有一个没条带,很是奇怪.
3楼2012-04-13 15:39:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-13 18:38:21
xiaomuxiaoma: 金币+1, 有帮助 2012-04-17 10:50:07
我实验室也遇到这种情况,也像你一样把BUffer,酶,水都换了发现没解决,最后发现是枪的问题,建议你去其他实验室(不做你那基因的),用人家的所有东西,别用自己的,估计就OK了。移液枪吸液时注意不要让液体误吸到枪体里,能清理的话隔一段时间用酒精洗一下。实验室做长了这种实验也会形成气溶胶,说不定就会跑到你的PCR体系里,建议这种易污染的实验在无菌操作台里操作。
希望能帮到你,祝实验顺利!
hehe
4楼2012-04-13 17:06:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 268求调剂 +6 简单点0 2026-03-02 7/350 2026-03-02 18:46 by caszguilin
[考研] 275求调剂 +6 明远求学 2026-03-01 6/300 2026-03-02 18:40 by caszguilin
[考研] 284求调剂 +5 天下熯 2026-03-02 5/250 2026-03-02 18:38 by caszguilin
[考研] 材料085601调剂 +3 多多子. 2026-03-02 3/150 2026-03-02 17:37 by yeahyou
[考研] 一志愿东北大学材料专硕328,求调剂 +3 shs1083 2026-03-02 3/150 2026-03-02 17:27 by houyaoxu
[考研] 化工京区271求调剂 +5 11ing 2026-03-02 5/250 2026-03-02 17:16 by houyaoxu
[考研] 338求调剂 +3 18162027187 2026-03-02 3/150 2026-03-02 13:12 by houyaoxu
[考研] 化工270求调剂 +8 什么名字qwq 2026-03-02 8/400 2026-03-02 13:03 by houyaoxu
[考研] 292求调剂 +7 yhk_819 2026-02-28 7/350 2026-03-02 12:43 by 无际的草原
[考研] 276求调剂 +4 路lyh123 2026-02-28 5/250 2026-03-02 11:20 by yuchj
[考研] 0856材料与化工,270求调剂 +8 YXCT 2026-03-01 9/450 2026-03-02 11:01 by 无际的草原
[考研] 274求调剂 +3 cgyzqwn 2026-03-01 7/350 2026-03-02 10:38 by lature00
[考研] 0857调剂 +4 一ll半 2026-02-28 5/250 2026-03-02 02:33 by 908055542
[基金申请] 本子写完了,给DS兄弟看了,得了92分 +3 Doma 2026-03-01 7/350 2026-03-02 00:00 by jnzsy
[基金申请] 成果系统访问量大,请一小时后再尝试。---NSFC啥时候好哦,已经两天这样了 +4 NSFC2026我来了 2026-02-28 4/200 2026-03-01 22:37 by 铁门栓
[硕博家园] 博士自荐 +7 科研狗111 2026-02-26 11/550 2026-03-01 22:24 by 哲平L
[考研] 0856求调剂285 +10 吕仔龙 2026-02-28 10/500 2026-03-01 21:37 by 公瑾逍遥
[考研] 0856材料求调剂 +11 hyf hyf hyf 2026-02-28 12/600 2026-03-01 18:57 by 18137688336
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 285求调剂 +8 满头大汗的学生 2026-02-28 8/400 2026-03-01 16:47 by caszguilin
信息提示
请填处理意见