| 查看: 497 | 回复: 1 | |||
wangjunwiner金虫 (初入文坛)
|
[求助]
烟草反转录PCR 求助
|
|
我要做烟草的反转录PCR，检测一种酶在RNA水平的转录量。但是我是一个新手，上面也没有人指导。所有的东西都要重新购买 求各位网友从购买需要的试剂，耗材开始指导下 。我要从提取总RNA开始做。PCR出来相关酶的表达量和一个内参。 再次感谢大家。 |
回复此楼» 猜你喜欢
江苏省优青门槛
已经有20人回复
-
心好累。今年我们部门提交了18个项目。中了11了，可惜我的又挂了
已经有10人回复
-
植物学论文润色/翻译怎么收费?
已经有277人回复
-
面上项目计划书
已经有7人回复
-
面上项目计划书附件
已经有9人回复
-
面上项目计划书系统状态
已经有18人回复
-
NSFC-UNEP（与联合国环境规划署）合作项目
已经有33人回复
-
和伊朗人合作
已经有32人回复
-
江苏省自然基金
已经有7人回复
-
生命科学新英文普刊《INVESTIGATION OF LIFE SCIENCE》
已经有8人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 做miRNA定量PCR之前的反转录
已经有9人回复
- PCR扩增 水稻未知基因 反转录
已经有6人回复
- 反转录PCR对提出来的总RNA纯度有什么要求 DNA用dna酶去除，酶不影响后续实验吗？
已经有5人回复
- 关于反转录得到的cDNA的PCR问题
已经有3人回复
- miRNA反转录后PCR产物跑电泳，有点拖尾，什么原因啊？真心求助！！
已经有13人回复
- 反转录要求42度30分钟，85 度5分钟，如果在pcr仪上进行，盖子的温度要不要设置。
已经有28人回复
- 提取RNA后，反转录后用β-actinpcr很多条带
已经有20人回复
- rna终于提取出来了，可是反转录pcr（rt pcr）没有条带
已经有19人回复
- 反转录获得cDNA后，为什么还要做RT-PCR?
已经有4人回复
- 反转录之后PCR扩增片段问题的请教，急急急
已经有5人回复
- 请教RNA提取高手：反转录PCR（RT-PCR)中DNA的去除
已经有18人回复
- 提RNA反转录后，用GAPDH和TLR进行PCR，可是GAPDH条带很亮，TLR怎么都出不来
已经有14人回复
- 提出来是一回事，提得好是另外一回事-----RNA
已经有9人回复
- 反转录后PCR无条带
已经有5人回复
- 关于RT-PCR中反转录酶的问题
已经有3人回复
- 【求助/交流】羊反转录产物做PCR,3KB,是EX TAQ好，还是LA TAQ 好
已经有6人回复
- 【求助/交流】为什么我反转录PCR的抗体的轻链基因测序后发现总是有终止子？
已经有6人回复
- 【求助/交流】5-RACE问题
已经有14人回复
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
本人都是用从生物公司（艾德莱）买的植物RNA专用试剂盒——《RNApure超纯总RNA快速提取试剂盒》，提过几次，效果都很好。提取后做RT-PCR，第一链的合成用的Primer是oligo(dT)18 prime 反应体系： RNA模板：0.1ng-5ug Oligo(dT)18 1ul Water,nuclease-free 至12ul 65摄氏度5分钟，这步是为了消除发卡结构 然后加5X Reaction Buffer 4ul Ribolock RNase inhibitor(20u/ul) 1ul 10mM dNTP Mix 2ul ReverAid M-MuLV Reverse Transcriptase (200u/ul) 1ul 总共20ul 42度孵育1小时就行 |
2楼2013-05-20 21:24:25
20