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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于反转录得到的cDNA的PCR问题
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松松一号

木虫 (正式写手)

[求助] 关于反转录得到的cDNA的PCR问题

提取得到植物的总RNA ，反转录之后得到cDNA，

根据文献合成引物PCR得到的cDNA的内参基因，结果如下图：


大家看下，250bp左右的是目的条带，最前面的最亮的是干扰。

麻烦分析下可能是什么问题呢？
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try try ! Day Day comfortable……
1楼 2012-09-05 10:44:11
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hlwnxfd2011

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是引物二聚体吧，跟你请教下你的内参基因的引物是怎么找的呢？谢谢
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2楼2012-09-05 15:33:36
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lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这跑的是内参基因电泳图吗？分析下可能有几个原因，1模板浓度过低，2引物不好，3PCR条件需要优化。
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生物化学与分子生物学
3楼2012-09-05 15:56:48
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松松一号

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hlwnxfd2011 at 2012-09-05 15:33:36
是引物二聚体吧，跟你请教下你的内参基因的引物是怎么找的呢？谢谢

根据文献的。
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try try ! Day Day comfortable……
4楼2012-09-05 18:36:36
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