24小时热门版块排行榜    

查看: 1598  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zhangxujia

新虫 (初入文坛)

[求助] 转基因烟草DNA可以检测到目的条带,RNA反转录的CDNA进行检测不到目的条带

通过DNA目的条带检测,共得到18株转基因烟草。提取了RNA进行逆转录的进行目的条带的检测,却一株也检测不到。CDNA进行GUS、HYG的验证PCR却是条带有的。已知RNA提取成功,ACTION是有有的。如果说基因没有转进去,那么DNA的目的条带的检测是不可能检测得到,说明是转进去了。会不会是嵌合体,如果是嵌合体那18株一个都没有,这个正常么?求教,各位大侠啊  
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

传统人士

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

您好,请问您的转基因烟草是用什么引物进行PCR验证的啊,通用引物还是特异引物呢
5楼2018-10-16 08:47:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看下载体构建有没有问题?
也有可能是转进去了却不表达,所以能检测到DNA却没有逆转录
你的日子如何,你的力量也必如何!
2楼2013-05-10 14:35:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangxujia

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sxxuan at 2013-05-10 14:35:35
看下载体构建有没有问题?
也有可能是转进去了却不表达,所以能检测到DNA却没有逆转录

载体构建是用的pCAMBIA13011,35S启动子的。转进去了,目的基因没有表达,而HYG、GUS却表达了,这种情况多见么?还是说转录出来的RNA立即被非特异性地剪切。头疼~~~
3楼2013-05-10 17:42:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
35S产生的RNA, 就算序列很特殊很短命应该不会马上被讲解得PCR都做不出来吧.
再查查你做出的载体序列, 35S还在?
4楼2013-05-12 00:35:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +3 羊腰板 2026-08-21 3/150 2026-08-21 19:42 by kulium
[基金申请] 科研孤儿太难了 +16 我4大白菜 2026-08-20 17/850 2026-08-21 19:07 by sakuraai
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +15 医学老男孩 2026-08-20 19/950 2026-08-21 18:54 by 医学老男孩
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 14/700 2026-08-21 16:51 by applepetty
[基金申请] 让我中一个面上吧! +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +23 yaoyewhu2008 2026-08-20 25/1250 2026-08-21 12:19 by Poppy1104
[基金申请] 什么时候开奖? +7 CrisMessi 2026-08-18 7/350 2026-08-21 12:15 by weiyin
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
请填处理意见