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永远不知道

至尊木虫 (著名写手)

金花家族创始人

[求助] 关于蛋白质的跑胶

1.什么是变性胶,什么是非变性胶,我跑的是SDS-PAGE,跑完后蛋白是否具有活性
2.什么是连续胶,什么是不连续胶
3.做目的蛋白的抗体前需要先知道蛋白的那些性质?
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
永远不知道: 金币+5, 有帮助, 谢谢 2013-04-17 16:31:56
3.做目的蛋白的抗体前需要先知道蛋白的那些性质?
那要看你的具体目的,如果直接就是需要做个该蛋白质的单克隆抗体,就直接知道分子量和序列就行,关键是免疫实验动物后的免疫原性。如果你要想确定该蛋白质的具体抗原免疫簇,那就要利用NMR,X-ray diffraction测定抗原-抗体的结合位点的结构,或者用基因敲处目的蛋白质的相关氨基酸来影响其免疫原性,或者对目的蛋白质的有关的氨基酸进行化学修饰来影响其免疫原性,还可以直接用电子显微镜或者原子力显微镜直接观测抗原-抗体的相互作用来确定抗原的抗原免疫簇。要在研究该蛋白质的其他与免疫有关的特征,好需要其他具体信息。。。
8楼2013-04-17 11:57:40
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查看全部 18 个回答

梁以薰

木虫 (著名写手)

看不懂的说……

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
如人饮水,冷暖自知
2楼2013-04-16 18:51:55
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_小小鸟

金虫 (正式写手)

御林军

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
永远不知道: 金币+2, 还行 2013-04-16 20:49:51
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,鼓励应助,分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-17 10:16:16
1、SDS-page是变性胶,蛋白跑之前就变性了。不加SDS是非变性胶,可保留蛋白活性。
2、非连续电泳包括浓缩胶和分离胶,离子浓度和pH不一样,连续胶只有分离胶
3、抗体这一部分不是很熟悉
一米阳光照大地。。。
3楼2013-04-16 19:25:03
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小科研女dow

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
永远不知道: 金币+2, 你竟然煮了10分钟啊 2013-04-16 20:50:24
你跑SDS-PAGE之前会有一个步骤
就是在100℃下煮沸10分钟
主要就是让蛋白失活
所以SDS后蛋白没有活性了
做出色的科研人
4楼2013-04-16 20:15:13
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