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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于蛋白质的跑胶
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永远不知道

至尊木虫 (著名写手)

金花家族创始人

[求助] 关于蛋白质的跑胶

1.什么是变性胶，什么是非变性胶，我跑的是SDS-PAGE，跑完后蛋白是否具有活性
2.什么是连续胶，什么是不连续胶
3.做目的蛋白的抗体前需要先知道蛋白的那些性质？
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1楼 2013-04-16 17:59:03
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小科研女dow

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
永远不知道: 金币+2, 你竟然煮了10分钟啊 2013-04-16 20:50:24
你跑SDS-PAGE之前会有一个步骤
就是在100℃下煮沸10分钟
主要就是让蛋白失活
所以SDS后蛋白没有活性了
赞一下 回复此楼
做出色的科研人
4楼2013-04-16 20:15:13
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梁以薰

木虫 (著名写手)
看不懂的说……

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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如人饮水，冷暖自知
2楼2013-04-16 18:51:55
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_小小鸟

金虫 (正式写手)

御林军

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
永远不知道: 金币+2, 还行 2013-04-16 20:49:51
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-17 10:16:16
1、SDS-page是变性胶，蛋白跑之前就变性了。不加SDS是非变性胶，可保留蛋白活性。
2、非连续电泳包括浓缩胶和分离胶，离子浓度和pH不一样，连续胶只有分离胶
3、抗体这一部分不是很熟悉
赞一下 回复此楼
一米阳光照大地。。。
3楼2013-04-16 19:25:03
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天 2013-04-17 10:16:35
SDS是强离子去垢剂，破坏蛋白质的高级结构，并与担保结合使其带负电荷。SDS-PAGE的样品已经完全失去生物活性，不管蛋白质的天然等电点如何，都是从负极向正极跑的。做目的抗体的抗原来源可以做全蛋白表达、部分蛋白表达或者是合成肽段。如果做全蛋白表达的话，直接把目的蛋白的序列克隆到大肠杆菌里过表达后纯化。如果做部分蛋白表达或者合成肽段，需要分析蛋白的表面抗原性。
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5楼2013-04-17 07:32:19
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