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永远不知道

至尊木虫 (著名写手)

金花家族创始人

[求助] 关于蛋白质的跑胶

1.什么是变性胶,什么是非变性胶,我跑的是SDS-PAGE,跑完后蛋白是否具有活性
2.什么是连续胶,什么是不连续胶
3.做目的蛋白的抗体前需要先知道蛋白的那些性质?
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天 2013-04-17 10:16:35
SDS是强离子去垢剂,破坏蛋白质的高级结构,并与担保结合使其带负电荷。SDS-PAGE的样品已经完全失去生物活性,不管蛋白质的天然等电点如何,都是从负极向正极跑的。做目的抗体的抗原来源可以做全蛋白表达、部分蛋白表达或者是合成肽段。如果做全蛋白表达的话,直接把目的蛋白的序列克隆到大肠杆菌里过表达后纯化。如果做部分蛋白表达或者合成肽段,需要分析蛋白的表面抗原性。
5楼2013-04-17 07:32:19
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查看全部 18 个回答

梁以薰

木虫 (著名写手)

看不懂的说……

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
如人饮水,冷暖自知
2楼2013-04-16 18:51:55
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_小小鸟

金虫 (正式写手)

御林军

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
永远不知道: 金币+2, 还行 2013-04-16 20:49:51
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,鼓励应助,分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-17 10:16:16
1、SDS-page是变性胶,蛋白跑之前就变性了。不加SDS是非变性胶,可保留蛋白活性。
2、非连续电泳包括浓缩胶和分离胶,离子浓度和pH不一样,连续胶只有分离胶
3、抗体这一部分不是很熟悉
一米阳光照大地。。。
3楼2013-04-16 19:25:03
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小科研女dow

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
永远不知道: 金币+2, 你竟然煮了10分钟啊 2013-04-16 20:50:24
你跑SDS-PAGE之前会有一个步骤
就是在100℃下煮沸10分钟
主要就是让蛋白失活
所以SDS后蛋白没有活性了
做出色的科研人
4楼2013-04-16 20:15:13
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