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yucuiyuan00金虫 (正式写手)
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[求助]
为什么荧光定量PCR扩增曲线呈倒S型已有2人参与
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图是我做的荧光定量PCR扩增曲线,两条线是一模一样的样品跑出来的,但是一个就是正常的S型曲线,一个就是倒S型的.我用的TaqMan探针.这样的结果出现很多次了,就是不知道问题出哪儿了,所以来求助了. 未命名.jpg |
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 核酸生物学实验经验 | QPCR 问题简答 |
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cdl007
木虫 (正式写手)
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【答案】应助回帖
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小丹木木: 金币+3, 专家考核, 专家辛苦了 2013-04-11 17:17:57
yucuiyuan00: 金币+10, ★有帮助, 提高阈值线了 两个重复的Ct值会差太多 这杨做肯定不行 我做过熔解曲线 引物没有二聚体 不过谢谢你的回答 2013-04-12 08:28:37
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小丹木木: 金币+3, 专家考核, 专家辛苦了 2013-04-11 17:17:57
yucuiyuan00: 金币+10, ★有帮助, 提高阈值线了 两个重复的Ct值会差太多 这杨做肯定不行 我做过熔解曲线 引物没有二聚体 不过谢谢你的回答 2013-04-12 08:28:37
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这不是倒s，而是s的前段放大了看就是这个效果，前面这个峰可以通过提高阈值（软件设置）压下去， 循环数太大可以通过稀释你的模板搞定，没有溶解曲线，不知道你的引物怎么样，不过估计也不会太好，可以另外设计一对新引物 |
7楼2013-04-11 16:58:53
yucuiyuan00
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yiloutingyu
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yucuiyuan00
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4楼2013-04-11 08:47:27