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machao8405

木虫 (正式写手)

[求助] 荧光定量PCR奇事

用量家不同公司的荧光试剂,做同一个基因,跑出来的溶解曲线位置不一样,请问这合理么?
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木马王子

金虫 (正式写手)


我也见到过这种情况
3楼2013-04-11 15:19:02
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小虫子666

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天 2013-04-14 15:32:03
我认为是合理的,这就跟用不同公司的tap的扩增效率不同类似的。每个公司的染料它的结合效率肯定有所不同。只要你所有的样品用一家公司的稳定,重现性好。就可以使用。
2楼2013-04-10 15:36:25
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hxm007199

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个应该算是正常的,不同的荧光物质,被机器检出的阈值应该是不同的
生可忍,熟不可忍!
4楼2013-04-11 17:35:15
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machao8405

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小虫子666 at 2013-04-10 15:36:25
我认为是合理的,这就跟用不同公司的tap的扩增效率不同类似的。每个公司的染料它的结合效率肯定有所不同。只要你所有的样品用一家公司的稳定,重现性好。就可以使用。

但是有一家的试剂整体溶解曲线的峰向左飘,另一家试剂在80多一点的峰在这家试剂可能飘到80以前了,而80以前的峰多被认为是引物二聚体,这样是不是会影响判断结果
5楼2013-04-14 12:50:54
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