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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 荧光定量PCR奇事
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machao8405

木虫 (正式写手)

[求助] 荧光定量PCR奇事

用量家不同公司的荧光试剂，做同一个基因，跑出来的溶解曲线位置不一样，请问这合理么？
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1楼 2013-04-10 15:26:13
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小虫子666

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天 2013-04-14 15:32:03
我认为是合理的，这就跟用不同公司的tap的扩增效率不同类似的。每个公司的染料它的结合效率肯定有所不同。只要你所有的样品用一家公司的稳定，重现性好。就可以使用。
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2楼2013-04-10 15:36:25
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木马王子

金虫 (正式写手)
我也见到过这种情况
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3楼2013-04-11 15:19:02
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hxm007199

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个应该算是正常的，不同的荧光物质，被机器检出的阈值应该是不同的
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生可忍，熟不可忍！
4楼2013-04-11 17:35:15
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machao8405

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小虫子666 at 2013-04-10 15:36:25
我认为是合理的，这就跟用不同公司的tap的扩增效率不同类似的。每个公司的染料它的结合效率肯定有所不同。只要你所有的样品用一家公司的稳定，重现性好。就可以使用。

但是有一家的试剂整体溶解曲线的峰向左飘，另一家试剂在80多一点的峰在这家试剂可能飘到80以前了，而80以前的峰多被认为是引物二聚体，这样是不是会影响判断结果
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5楼2013-04-14 12:50:54
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machao8405

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 木马王子 at 2013-04-11 15:19:02
我也见到过这种情况

但是有一家的试剂整体溶解曲线的峰向左飘，另一家试剂在80多一点的峰在这家试剂可能飘到80以前了，而80以前的峰多被认为是引物二聚体，这样是不是会影响判断结果
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6楼2013-04-14 12:51:00
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machao8405

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by hxm007199 at 2013-04-11 17:35:15
这个应该算是正常的，不同的荧光物质，被机器检出的阈值应该是不同的

但是有一家的试剂整体溶解曲线的峰向左飘，另一家试剂在80多一点的峰在这家试剂可能飘到80以前了，而80以前的峰多被认为是引物二聚体，这样是不是会影响判断结果
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7楼2013-04-14 12:51:06
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