24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3900  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

liqingabcd

铜虫 (小有名气)


[交流] 如何浓缩PCR产物?

求助大家,如何对PCR产物进行浓缩?还有大家知道对DNA定量的比较好的方法吗?研一新手,谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小渣蛋

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
好像除了PCR产物回收KIT外没啥好方法!PCR片段比较小,用酒精或者异丙醇不易沉淀浓缩啊!
4楼2013-03-12 21:13:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

wiln1

金虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
跑电泳切胶回收、有专门的核酸定量仪器
2楼2013-03-12 19:59:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

phhcrab

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
看你要怎么浓缩了,如果要把几份产物浓缩成一份的话,可以试试乙醇浓缩沉淀。
定量也是看你要哪个程度的了,总的DNA定量的话,就核酸蛋白测定仪,其实也就是分光光度计,检测OD260。要对某个基因定量,可以做荧光定量PCR。
3楼2013-03-12 20:17:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sxxuan

金虫 (著名写手)


★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-03-13 19:48:57
楼上也有虫友说到,一般就用无水乙醇或PCR纯化试剂盒浓缩。与楼上相反,片段小的PCR产物我会用2.5V的无水乙醇和1/10V的醋酸钠去沉淀,损失在所难免,胜在溶解的时候可以自己控制加多少水或者TE,相对也就达到了浓缩的效果。
而用kit,就像是纯化一样,把多管PCR产物都集中在一个纯化柱,也就是相对地浓缩了,洗脱的时候最好分成两步去洗脱,或者洗脱一次后重复加到纯化柱再洗脱一次,效果会好一点。
检测浓度的话,我们实验室有紫外风光光度计测OD260,也有专门的核酸检测仪直接读数的。其实两者的原理是一样的。再有的话就是3楼说的荧光定量PCR,如果本身没有引物探针的话就用吸光值确定算了,合成探针也不便宜。
5楼2013-03-13 09:02:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 080500求调剂 +11 黄宇博 2026-04-06 11/550 2026-04-07 07:53 by 0谦谦0
[考研] 工科 22408 267求推荐 +4 wanwan00 2026-04-05 5/250 2026-04-06 22:47 by chenzhimin
[硕博家园] 0856材料化工求调剂,一志愿211,初试成绩349 +4 江淮北月 2026-04-05 4/200 2026-04-06 22:44 by chenzhimin
[考研] 材料334求调剂 +19 Eecho# 2026-04-03 19/950 2026-04-06 08:37 by 小小树2024
[考研] 320分人工智能调剂 +8 振—TZ 2026-04-03 8/400 2026-04-05 22:33 by 范式思维
[考研] 求调剂 +10 Hll胡 2026-04-04 10/500 2026-04-05 20:09 by nepu_uu
[考研] 295求调剂 +8 FZAC123 2026-04-03 8/400 2026-04-05 17:46 by 蓝云思雨
[考研] 275求调剂 +16 waltzh 2026-04-01 16/800 2026-04-05 17:14 by Hdyxbekcb
[考研] 081700学硕,323分,一志愿中国海洋大学求调剂学校 +16 披星河 2026-04-04 16/800 2026-04-05 11:27 by 猪会飞
[考研] 能动调剂326专硕 +4 wan112233 2026-04-04 4/200 2026-04-04 22:47 by yu221
[考研] 一志愿华北电力大学(北京),材料科学与工程学硕265,求调剂 +11 yelck 2026-04-03 12/600 2026-04-04 19:52 by dongzh2009
[考研] 400分求调剂 +3 尴尬且挠头 2026-04-04 3/150 2026-04-04 08:41 by jp9609
[考研] 求调剂 +4 压力??大 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:36 by 啵啵啵0119
[考研] 材料专硕322分 +13 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-01 13/650 2026-04-03 16:08 by 哦哦123
[考研] 302求调剂 +9 zyx上岸! 2026-04-02 9/450 2026-04-02 23:07 by 马儿快快地跑
[考研] 293求调剂 +4 珂珂乐 2026-04-02 4/200 2026-04-02 20:10 by 6781022
[考研] 学硕化学工程与技术,一志愿中国海洋大学320+求调剂 +8 披星河 2026-04-02 8/400 2026-04-02 14:12 by oooqiao
[考研] 材料专业求调剂 +10 月月鸟木 2026-04-01 10/500 2026-04-02 12:57 by wxiongid
[考研] 286求调剂 +5 Sa67890. 2026-04-01 7/350 2026-04-01 19:50 by 6781022
[考研] 材料专业调剂 +5 啦啦啦哭 2026-03-31 6/300 2026-04-01 16:48 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见