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崔t-o-p

新虫 (初入文坛)

[求助] 紧急求助!220KDa蛋白纯化。。。

我要做一个细菌完整毒力基因的原核表达,基因全长6087bp,连在PET32a上,测序都正确,且表达为包涵体形式。用普通的镍柱纯化,有杂带也就算了,我纯化下来的目的蛋白仅有一条细细的线。。。根本不能进行后续的试验。
     参考其他大家的纯化方法多挂了好几次柱子,咪唑浓度梯度洗脱,效果都不佳,希望大家帮帮忙。。极度崩溃中。。。
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srwangws

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以用包涵体纯化试一下
3楼2013-03-12 09:15:29
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