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xiaoyu0127

铜虫 (小有名气)

[求助] 求助 膜蛋白纯化 IP

背景:本人主要研究一种白细胞上的膜蛋白A,导师要求我从血中提取膜蛋白,再用beads-A单抗这一类似IP的方法把我所需要的膜蛋白A纯化出来。
1.我知道有膜蛋白提取试剂盒,有虫友用过否,可行性怎样,麻烦推荐品牌型号。
2.以上用beads-A单抗这一类似IP的求助 膜蛋白纯化 IP方法拉目的蛋白是否可行,是否与IP步骤相同,有什么需要特别注意的地方吗。
3.提前感谢虫友的耐心解答。
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edoz1986

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xiaoyu0127: 金币+2, 有帮助, 谢谢,我是用试剂盒,应该包含这一成分。另外,试剂盒提取量大吗,我后续实验需要 2013-05-17 15:03:28
myprayer: 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-22 21:19:14
膜蛋白纯化要注意加入表面活性剂的。最好加入非离子性的,比如triton x100  不影响活性。
2楼2013-05-17 12:24:15
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edoz1986

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-29 23:28:09
引用回帖:
2楼: Originally posted by edoz1986 at 2013-05-17 12:24:15
膜蛋白纯化要注意加入表面活性剂的。最好加入非离子性的,比如triton x100  不影响活性。

我们做的都是带标签的,在破碎细胞的时候就加入表面活性剂的。还有一个就是,如果蛋白是存在于周质空间(内外膜中间)的话,要用到蔗糖高低渗的方法,这个百度就有了。
3楼2013-05-22 17:18:52
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xiaoyu0127

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by edoz1986 at 2013-05-22 17:18:52
我们做的都是带标签的,在破碎细胞的时候就加入表面活性剂的。还有一个就是,如果蛋白是存在于周质空间(内外膜中间)的话,要用到蔗糖高低渗的方法,这个百度就有了。...

请问膜蛋白提取做怎样的对照合适呢?
4楼2013-06-28 10:17:03
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