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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 如何分离纯化组蛋白
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liuxinyueer

木虫 (正式写手)

[求助] 如何分离纯化组蛋白 已有1人参与

怎么在一大堆蛋白质里分离出组蛋白？
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1楼 2014-08-30 16:19:41
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shale1983

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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liuxinyueer: 金币+15 2014-08-31 10:16:43
可以根据蛋白的性质先大量分离杂蛋白，如用PEG沉淀或者（NH4）2SO4，然后再用凝胶色谱分离纯化。大概的思路是这样的。希望对你有帮助吧
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2楼2014-08-30 21:45:28
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zhang001zh

银虫 (小有名气)
为什么会在一大堆蛋白质里面。。。现在有好多商品试剂盒可以提取组蛋白，蛮方便的。组蛋白都在细胞核里，可以把细胞打浆低速离心拿到细胞核，然后用再破碎细胞核，分离组蛋白和DNA，高盐buffer沉掉杂质，然后去做纯化，由于组蛋白还有大量碱性氨基酸，所以可以用阳离子交换柱挂住，或者用金属鳌合层析应该也不错。
前面还提到了硫酸铵沉淀什么的，不知道你要的是那种组蛋白，如果是聚合体应该可以，但是hi分子量比较小，估计会很难沉淀，所以应该在上清液里面。

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3楼2014-08-31 11:07:53
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liuxinyueer

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhang001zh at 2014-08-31 11:07:53
为什么会在一大堆蛋白质里面。。。现在有好多商品试剂盒可以提取组蛋白，蛮方便的。组蛋白都在细胞核里，可以把细胞打浆低速离心拿到细胞核，然后用再破碎细胞核，分离组蛋白和DNA，高盐buffer沉掉杂质，然后去做纯 ...

谢谢 你的回答对我很有用
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4楼2014-08-31 11:46:16
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