应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 【求助/交流】求助 小分子量蛋白多肽纯化
131/1返回列表
查看: 2280  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

crystal8595

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】求助 小分子量蛋白多肽纯化

重组酵母菌发酵液过了一次离子柱，目标蛋白在7000kDa左右（红圈标出），但在20kDa以上有一些杂蛋白，我想把这些杂蛋白与我的目标蛋白分离，想先用50kDa的超滤去除大分子量的蛋白，然后用Sephadex G50分，不知道合适不合适啊，Bio-gel p10呢~
请各位帮帮忙，谢谢~



[ Last edited by crystal8595 on 2011-1-9 at 20:33 ]
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

多肽类抗菌素，发酵提纯，生物药研发

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-01-09 20:31:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
引用回帖:
Originally posted by crystal8595 at 2011-01-10 10:57:49:
哦~这个超滤管上样应该挺小的吧，我是做重组蛋白分离的，不做晶体~我想用10kDa的超滤膜也可以的吧


呵呵，超滤管有小有大（小的可以用来纯化微量的DNA，大的可以处理发酵液上清），主要得看你的离心机大小了。超滤膜没用过，不过原理都是截留，应该没什么问题。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-01-10 11:05:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
★
rainwander(金币+1):鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-09 21:43:27
MM你先搞清楚，你的目的蛋白是7kDa，不是7000kDa。所以你可以用10kDa的超滤管超滤，滤出液中是你的蛋白。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-01-09 20:48:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
crystal8595(金币+1): 2011-01-10 08:55:03
G50的分离范围是1500-30000，理论上是可行的，试一把吧。
赞一下 回复此楼
3楼2011-01-09 20:52:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

crystal8595

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-01-09 20:48:48:
MM你先搞清楚，你的目的蛋白是7kDa，不是7000kDa。所以你可以用10kDa的超滤管超滤，滤出液中是你的蛋白。

额...没注意，打错咧，嘿 超滤管很贵吧
赞一下 回复此楼
4楼2011-01-09 21:58:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
★ ★
dhd997(金币+2):热心 2011-01-10 09:09:45
引用回帖:
Originally posted by crystal8595 at 2011-01-09 21:58:44:

额...没注意，打错咧，嘿 超滤管很贵吧

几十块钱一个，呵呵，不算贵。如果总是用它来纯化同一个蛋白的话，可以用很久的，实验室的一个博士说他的一批超滤管用了快两年了。

你也是做蛋白晶体的？？？
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-01-09 22:05:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

crystal8595

银虫 (初入文坛)
哦~这个超滤管上样应该挺小的吧，我是做重组蛋白分离的，不做晶体~我想用10kDa的超滤膜也可以的吧
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-01-09 22:05:07:


几十块钱一个，呵呵，不算贵。如果总是用它来纯化同一个蛋白的话，可以用很久的，实验室的一个博士说他的一批超滤管用了快两年了。

你也是做蛋白晶体的？？？

赞一下 回复此楼
6楼2011-01-10 10:57:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

crystal8595

银虫 (初入文坛)
谢谢咯，请问您用的那种大的超滤管是什么公司的呢？我查了查好像都是进口的，还挺贵呢~
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-01-10 11:05:37:
呵呵，超滤管有小有大（小的可以用来纯化微量的DNA，大的可以处理发酵液上清），主要得看你的离心机大小了。超滤膜没用过，不过原理都是截留，应该没什么问题。

赞一下 回复此楼
8楼2011-01-10 11:18:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by crystal8595 at 2011-01-10 11:18:20:
谢谢咯，请问您用的那种大的超滤管是什么公司的呢？我查了查好像都是进口的，还挺贵呢~

进口的，呵呵。amicon 的超滤管，大的是比较贵。中等大小的和小的就比较便宜。因为我们都是破壁后作的，所以用不上那么大的。
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2011-01-10 11:20:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
有AKTA的话也就用不到大的超滤管了，直接用离子交换柱纯化，浓缩。然后想过分子筛的话再用超滤管进行浓缩就OK了，体积也用不了那么大。
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2011-01-10 11:23:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

crystal8595

银虫 (初入文坛)
恩，我先用凝胶一下试试吧，再次感 谢啦~~~~~
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-01-10 11:23:59:
有AKTA的话也就用不到大的超滤管了，直接用离子交换柱纯化，浓缩。然后想过分子筛的话再用超滤管进行浓缩就OK了，体积也用不了那么大。

赞一下 回复此楼
11楼2011-01-10 11:26:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
小分子可以参考透析袋，更便宜
赞一下(1人) 回复此楼
12楼2011-01-10 11:40:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leibo15

禁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
本帖内容被屏蔽
13楼2011-01-10 14:18:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 crystal8595 的主题更新
131/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +6 一鸭鸭哟 2026-03-14 7/350 2026-03-15 22:12 by Winj1e
[文学芳草园] 伙伴们，祝我生日快乐吧 +15 myrtle 2026-03-10 24/1200 2026-03-15 21:16 by 苏州_逗号
[考研] 0703化学调剂 ，六级已过，有科研经历 +4 曦熙兮 2026-03-15 4/200 2026-03-15 18:01 by JourneyLucky
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[考研] 328求调剂 +3 5201314Lsy！ 2026-03-13 6/300 2026-03-14 15:31 by hyswxzs
[考研] 085600材料与化工 326 求调剂 +5 热爱生活ing 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:39 by JourneyLucky
[考研] 化学工程321分求调剂（南京工业，浙江工业） +3 大米饭！ 2026-03-09 4/200 2026-03-14 02:34 by JourneyLucky
[考研] 2026考研调剂+本科延边大学+山东大学+生物化学与分子生物学+有项目经验 +3 ccdsscjy 2026-03-09 6/300 2026-03-14 02:14 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +7 超级伊昂大王 2026-03-10 7/350 2026-03-14 00:49 by JourneyLucky
[考研] 341求调剂 +4 番茄头--- 2026-03-10 4/200 2026-03-13 23:12 by JourneyLucky
[考研] 材料工程调剂 +4 咪咪空空 2026-03-11 4/200 2026-03-13 19:57 by JourneyLucky
[考研] 0703化学求调剂 +7 绿豆芹菜汤 2026-03-12 7/350 2026-03-13 17:25 by njzyff
[考研] 求调剂 +7 18880831720 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:10 by JourneyLucky
[考研] 085600材料与化工 309分请求调剂 +7 dtdxzxx 2026-03-12 8/400 2026-03-13 14:43 by jxchenghu
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
[考研] 一志愿河海大学085900土木水利专硕279求调剂不挑专业 +4 SunWwWwWw 2026-03-10 8/400 2026-03-13 02:23 by SunWwWwWw
[考研] 纺织、生物、化学、材料相关专业招生了 +4 耶耶业 2026-03-09 7/350 2026-03-12 19:05 by Equinoxhua
[考研] 大连大学化学专业研究生调剂 +3 琪久. 2026-03-10 8/400 2026-03-11 10:02 by 琪久.
[考研] 一志愿：武汉理工，材料工程，英二数二 总分314 +3 2202020125 2026-03-10 4/200 2026-03-10 13:54 by xiongyaxuan
[硕博家园] 木虫好像不热闹了，是不是？ +4 偏振片 2026-03-10 4/200 2026-03-10 09:51 by longwave
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭