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【求助/交流】求助 小分子量蛋白多肽纯化
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crystal8595
银虫
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[交流]
【求助/交流】求助 小分子量蛋白多肽纯化
重组酵母菌发酵液过了一次离子柱,目标蛋白在7000kDa左右(红圈标出),但在20kDa以上有一些杂蛋白,我想把这些杂蛋白与我的目标蛋白分离,想先用50kDa的超滤去除大分子量的蛋白,然后用Sephadex G50分,不知道合适不合适啊,Bio-gel p10呢~
请各位帮帮忙,谢谢~
[
Last edited by crystal8595 on 2011-1-9 at 20:33
]
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1楼
2011-01-09 20:31:37
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brightfuture01
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★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
有AKTA的话也就用不到大的超滤管了,直接用离子交换柱纯化,浓缩。然后想过分子筛的话再用超滤管进行浓缩就OK了,体积也用不了那么大。
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10楼
2011-01-10 11:23:59
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brightfuture01
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★
rainwander(金币+1):鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-09 21:43:27
MM你先搞清楚,你的目的蛋白是7kDa,不是7000kDa。所以你可以用10kDa的超滤管超滤,滤出液中是你的蛋白。
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2楼
2011-01-09 20:48:48
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crystal8595(金币+1): 2011-01-10 08:55:03
G50的分离范围是1500-30000,理论上是可行的,试一把吧。
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2011-01-09 20:52:21
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引用回帖:
Originally posted by
brightfuture01
at 2011-01-09 20:48:48:
MM你先搞清楚,你的目的蛋白是7kDa,不是7000kDa。所以你可以用10kDa的超滤管超滤,滤出液中是你的蛋白。
额...没注意,打错咧,嘿 超滤管很贵吧
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4楼
2011-01-09 21:58:44
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