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liuxinyueer

木虫 (正式写手)

[求助] 如何分离纯化组蛋白 已有1人参与

怎么在一大堆蛋白质里分离出组蛋白?
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zhang001zh

银虫 (小有名气)

为什么会在一大堆蛋白质里面。。。现在有好多商品试剂盒可以提取组蛋白,蛮方便的。组蛋白都在细胞核里,可以把细胞打浆低速离心拿到细胞核,然后用再破碎细胞核,分离组蛋白和DNA,高盐buffer沉掉杂质,然后去做纯化,由于组蛋白还有大量碱性氨基酸,所以可以用阳离子交换柱挂住,或者用金属鳌合层析应该也不错。
前面还提到了硫酸铵沉淀什么的,不知道你要的是那种组蛋白,如果是聚合体应该可以,但是hi分子量比较小,估计会很难沉淀,所以应该在上清液里面。

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-08-31 11:07:53
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shale1983

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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liuxinyueer: 金币+15 2014-08-31 10:16:43
可以根据蛋白的性质先大量分离杂蛋白,如用PEG沉淀或者(NH4)2SO4,然后再用凝胶色谱分离纯化。大概的思路是这样的。希望对你有帮助吧
2楼2014-08-30 21:45:28
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liuxinyueer

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhang001zh at 2014-08-31 11:07:53
为什么会在一大堆蛋白质里面。。。现在有好多商品试剂盒可以提取组蛋白,蛮方便的。组蛋白都在细胞核里,可以把细胞打浆低速离心拿到细胞核,然后用再破碎细胞核,分离组蛋白和DNA,高盐buffer沉掉杂质,然后去做纯 ...

谢谢 你的回答对我很有用
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4楼2014-08-31 11:46:16
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