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lishaohe

新虫 (小有名气)

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[交流] PCR产物纯化后酶切，连接

最近需要通过PCR产物，酶切，连接转化B L21建菌库，但是PCR产物酶切，连接转化效率很低，请问各位大虾，有没有更好的办法。引物加了保护碱基。或者更好的建库方案，谢谢！

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peakg7

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1楼 2013-03-02 15:21:51

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charles08

铁杆木虫 (著名写手)

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★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

我也是用PCR产物纯化后直接连接载体的，效率非常非常的低
不知你最后是怎么解决的？

25楼2013-09-21 21:59:08

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peakg7

新虫 (小有名气)

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★
lishaohe(金币+3): 谢谢参与

送鲜花一朵

pcr产物直接回收，不要跑胶回收，效率会提高很多倍。

2楼2013-03-02 15:30:00

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lishaohe

新虫 (小有名气)

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虫号: 1946467

引用回帖:

2楼: Originally posted by peakg7 at 2013-03-02 15:30:00
pcr产物直接回收，不要跑胶回收，效率会提高很多倍。

我们就是直接回收的，片段很亮。直接用的就是PCR产物回收试剂盒

3楼2013-03-02 15:40:08

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peakg7

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引用回帖:

3楼: Originally posted by lishaohe at 2013-03-02 15:40:08
我们就是直接回收的，片段很亮。直接用的就是PCR产物回收试剂盒...

酶切效率不高，连接酶的问题？

4楼2013-03-02 16:15:41

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