应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » Western Blot结果 条带中间 不见了，请教高手！
51/1返回列表
查看: 3917  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

格子和潇潇

铜虫 (小有名气)

[求助] Western Blot结果 条带中间 不见了，请教高手！

第一次A样本，用B抗体曝光如下图：


第二次B样本，用同样的B抗体曝光出现了2条带，好像是中空的，两次的二抗浓度都是一样的，都是1:5000，可能是有些高，但是为啥第一次曝光就没事呢？


请教各位高手
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-02-01 22:05:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

格子和潇潇

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ccharlien at 2013-02-02 20:31:30
第一次的曝光时间太长了
曝光要在看的出各泳道差异的情况下尽量浅一些
第二次的没问题
可能是抗体特异性/蛋白异构体/降解/修饰 各种原因

如果曝光太浅，虽然也有差异，毕竟不好看；
抗体单克隆，“各种原因”实在难以想象，不知有没有同学有过类似情况
赞一下 回复此楼
5楼2013-02-02 23:05:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分析，欢迎交流 2013-02-03 09:32:08
问题可能有两种情况：
一：本身应该是一条带，由于电泳、转膜或者暴光胶片等原因，出现两条带。
二：抗体识别分子量接近的两条带，第一次由于抗体过强或者是电泳的原因，两条带没有分开。
我感觉第二种情况的可能性更大一些。
赞一下 回复此楼
2楼2013-02-02 12:12:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

格子和潇潇

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-02-02 12:12:22
问题可能有两种情况：
一：本身应该是一条带，由于电泳、转膜或者暴光胶片等原因，出现两条带。
二：抗体识别分子量接近的两条带，第一次由于抗体过强或者是电泳的原因，两条带没有分开。
我感觉第二种情况的可能 ...

一抗为单克隆抗体，本身应该为一条带；
电泳、转膜都没问题，其他一起的内参背景较浓，很可能是二抗浓度大或者没洗好的原因；
曝光时间短或者长都是这个情况；
马上要回家了，也来不及验证了
赞一下 回复此楼
3楼2013-02-02 12:53:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ccharlien

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-02-03 09:33:55
第一次的曝光时间太长了
曝光要在看的出各泳道差异的情况下尽量浅一些
第二次的没问题
可能是抗体特异性/蛋白异构体/降解/修饰 各种原因
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2013-02-02 20:31:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学调剂 ，六级已过，有科研经历 +8 曦熙兮 2026-03-15 8/400 2026-03-17 20:31 by xilongliang
[考研] 268求调剂 +7 好运连绵不绝 2026-03-12 8/400 2026-03-17 20:28 by xilongliang
[考研] 材料专硕306英一数二 +7 z1z2z3879 2026-03-16 9/450 2026-03-17 17:31 by ccjequ
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +3 困于星晨 2026-03-17 3/150 2026-03-17 14:08 by ms629
[考研] 化学调剂0703 +8 啊我我的 2026-03-11 8/400 2026-03-16 17:23 by 我的船我的海
[考研] 304求调剂 +5 素年祭语 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:00 by 我的船我的海
[考研] 一志愿211 0703方向310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by houyaoxu
[考研] 0703化学调剂 +6 妮妮ninicgb 2026-03-15 9/450 2026-03-16 16:40 by houyaoxu
[教师之家] 焦虑 +7 水冰月月野兔 2026-03-13 9/450 2026-03-16 10:00 by Quakerbird
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 材料工程327求调剂 +3 xiaohe12w 2026-03-11 3/150 2026-03-14 20:20 by ms629
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
[考研] 材料工程调剂 +9 咪咪空空 2026-03-12 9/450 2026-03-13 22:05 by 星空星月
[考研] 材料与化工085600调剂求老师收留 +9 jiaanl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 20:22 by JourneyLucky
[考研] 301求调剂 +6 Liyouyumairs 2026-03-11 6/300 2026-03-13 20:11 by JourneyLucky
[考研] 328化工专硕求调剂 +4 。，。，。，。i 2026-03-12 4/200 2026-03-13 14:44 by JourneyLucky
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂！ +3 不想理你 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:18 by JourneyLucky
[考研] 化工学硕306求调剂 +9 42838695 2026-03-12 9/450 2026-03-13 10:16 by houyaoxu
[考研] 270求调剂 085600材料与化工专硕 +3 YXCT 2026-03-11 3/150 2026-03-13 10:13 by houyaoxu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭