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chiden

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+3, MolEPI+1, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-02-01 21:13:08
在此想请问一个问题,楼主在扩增这个相关基因时设计的引物是刚好从起始密码子或终止密码子设计的?
在我们实验室,一般认为测序结果中前面80-100bp的测序结果是不准确的。不知道楼主那里的测序是不是从第一个碱基到最后一个碱基都保证是准确的?
遇到这样的问题,应该先去查一查测序结果中的ABI文件中碱基读取峰图。
看楼主上面说的似乎没有查证过。
如果峰型很好,说明测序公司给你的测序结果是准确的。
那么考虑是否真的发生了突变?
一般来说590bp一个反应足够了
还有要考虑的是PCR扩增的过程中是有一定的几率错配的
希望能帮到楼主吧,知道的也就这么多啦。。。
即使难过,也要微笑着走下去
2楼2013-02-01 20:15:50
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