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wawjp

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于酶切鉴定的疑问

想请问大家酶切鉴定的可信度到底有多高呢?我有一个大概不到2k的片段酶切鉴定成功,但是测序后只测到几百bp,是酶切鉴定出了问题还是测序不准确呢?求高手指教
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-09-29 15:10:35
两者选其一,我宁愿相信酶切,测序也有测不过去的时候。
真相是最大的奢侈品
2楼2011-09-29 09:59:36
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wawjp

新虫 (初入文坛)

但是测序的话只做了正反两个测序即测通了呢 感觉很奇怪
3楼2011-09-29 10:03:00
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

引用回帖:
3楼: Originally posted by wawjp at 2011-09-29 10:03:00:
但是测序的话只做了正反两个测序即测通了呢 感觉很奇怪

重叠区多大?
真相是最大的奢侈品
4楼2011-09-29 10:18:04
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wawjp

新虫 (初入文坛)

刚比对了一下上下游的测序结果,感觉更奇怪了,上下游前600bp是一样的,拼接结果给的也是这600的结果,感觉越来越不懂了
5楼2011-09-29 10:34:23
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asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-09-29 15:10:55
你的序列有2K大小,测序只测了600bp……那不就说明测序有问题了么,你是要求全部测通还是只要一个反应?
显微镜下的世界很精彩!
6楼2011-09-29 10:47:53
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wawjp

新虫 (初入文坛)

是要求测通的,现在是两个反应
7楼2011-09-29 11:01:27
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eileen8519

金虫 (小有名气)

测序这一块不是很懂,学习中……
是不是引物有问题啊?
8楼2011-09-29 11:28:23
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wawjp

新虫 (初入文坛)

引物用的载体上的通用引物呢
9楼2011-09-29 11:32:24
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yuxia82012

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-09-29 15:11:06
不是测两端吗?一般靠外的结果不可信,比起酶切来,测序结果真实度要大吧
在等待中涅槃重生
10楼2011-09-29 12:47:01
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