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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于酶切鉴定的疑问
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wawjp

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于酶切鉴定的疑问

想请问大家酶切鉴定的可信度到底有多高呢？我有一个大概不到2k的片段酶切鉴定成功，但是测序后只测到几百bp，是酶切鉴定出了问题还是测序不准确呢？求高手指教
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1楼 2011-09-29 09:53:00
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-09-29 15:10:35
两者选其一，我宁愿相信酶切，测序也有测不过去的时候。
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真相是最大的奢侈品
2楼2011-09-29 09:59:36
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wawjp

新虫 (初入文坛)
但是测序的话只做了正反两个测序即测通了呢 感觉很奇怪
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3楼2011-09-29 10:03:00
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根
引用回帖:
3楼: Originally posted by wawjp at 2011-09-29 10:03:00:
但是测序的话只做了正反两个测序即测通了呢 感觉很奇怪

重叠区多大？
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真相是最大的奢侈品
4楼2011-09-29 10:18:04
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wawjp

新虫 (初入文坛)
刚比对了一下上下游的测序结果，感觉更奇怪了，上下游前600bp是一样的，拼接结果给的也是这600的结果，感觉越来越不懂了
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5楼2011-09-29 10:34:23
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asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-09-29 15:10:55
你的序列有2K大小，测序只测了600bp……那不就说明测序有问题了么，你是要求全部测通还是只要一个反应？
、
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显微镜下的世界很精彩！
6楼2011-09-29 10:47:53
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wawjp

新虫 (初入文坛)
是要求测通的，现在是两个反应
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7楼2011-09-29 11:01:27
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eileen8519

金虫 (小有名气)
测序这一块不是很懂，学习中……
是不是引物有问题啊？
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8楼2011-09-29 11:28:23
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wawjp

新虫 (初入文坛)
引物用的载体上的通用引物呢
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9楼2011-09-29 11:32:24
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yuxia82012

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-09-29 15:11:06
不是测两端吗？一般靠外的结果不可信，比起酶切来，测序结果真实度要大吧
赞一下(1人) 回复此楼
在等待中涅槃重生
10楼2011-09-29 12:47:01
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