应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酶切鉴定图
111/2返回列表12下一页
查看: 1952  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

linatracy

金虫 (小有名气)

[交流] 酶切鉴定图 已有8人参与

大家帮忙看看，我这酶切鉴定的图，带特别淡，怎么样才可以使带变的亮呢？

Mark 为D15000的，后面两个都是酶切鉴定的

再注明一下，我跑28b的质粒的时候带就特别淡，之后做的连接，你们觉得是不是和我的质粒量少有关系呢？还有这样子的连接产物对表达量有没有关系？谢谢各位同仁了。

[ Last edited by linatracy on 2012-1-5 at 12:17 ]
回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

脱水拂空

» 猜你喜欢
1楼 2012-01-04 11:50:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

linatracy

金虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by 通缉要饭 at 2012-01-05 18:48:12:
和你面对一样的问题，我一般重新提质粒，用高浓度的质粒酶切

你效果怎么样？
赞一下 回复此楼
9楼2012-01-06 00:13:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wanhscn(金币+3, 专家考核): good！whs 2012-01-04 20:33:39
上样量可以加大点。如果是全部都拿来上样的，那酶切的DNA就应该用多一点了。
酶切前可以粗略计算下你的DNA浓度有多少，然后根据片段长度估计下酶切之后的条带分别有多少ng，之后调整酶切的DNA量。EB染色的话10ng就可以看到条带，但建议你保证每条带都在50ng以上，这样的条带就不会淡了。

举个例子：100ng的4kb的质粒，完全酶切之后，一条带是3kb，另一条是1kb，那它们的量就分别是75gn和25ng。这样子的话1 kb的带会比较弱。所以你应该切至少200ng的质粒。
不过也不是多多益善，太多的质粒，会酶切不完全甚至切不动。而且质粒本身因为不同构型就有2、3条带，会干扰结果。
赞一下(4人) 回复此楼
2楼2012-01-04 12:32:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

lw19850128

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
小丹木木(金币+1): 鼓励回帖 2012-01-04 15:40:48
染色剂用的什么？如果是EB或goldview1的话 建议提高点样量
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2012-01-04 14:24:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yidaqunyan

木虫 (正式写手)

博士
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wanhscn(金币+1): 也是个方法！ 2012-01-05 11:28:51
wanhscn(金币+2): 追加奖励！ 2012-01-05 11:29:22
可以PS，带就亮了。。
回复此楼
不孝有三，读博为大！
4楼2012-01-04 18:22:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

脱水拂空

铜虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
送鲜花一朵
你切的量少 多且量上样量再大些图就很好看啦
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2012-01-04 20:00:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fanfenggui

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
加大上样量，调节图片对比度，多加点儿EB等
赞一下(1人) 回复此楼
爱由心起！
6楼2012-01-05 00:11:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuyu_sdili

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+1): 有理！ 2012-01-06 18:50:56
看看你用的是几孔的梳子，相同的上样量点样孔小的比较清楚~~
赞一下(2人) 回复此楼
7楼2012-01-05 09:26:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

通缉要饭

金虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wanhscn(金币+2): 也行！ 2012-01-06 01:09:12
和你面对一样的问题，我一般重新提质粒，用高浓度的质粒酶切
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2012-01-05 18:48:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

韩锋红岩

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
增加酶切前产物的浓度：PCR延伸时间长一点，循环次数多一点，最重要的是要摸准最适合退火温度，可以做个温度梯度试试。
赞一下(1人) 回复此楼
啊啊
10楼2012-01-06 09:24:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 linatracy 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 324分 085600材料化工求调剂 +3 llllkkkhh 2026-03-18 3/150 2026-03-19 14:22 by houyaoxu
[考研] 化学求调剂 +3 临泽境llllll 2026-03-17 4/200 2026-03-19 13:59 by houyaoxu
[考研] 一志愿福大288有机化学，求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 085600材料与化工求调剂 +6 绪幸与子 2026-03-17 6/300 2026-03-19 13:27 by houyaoxu
[考研] 能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名 +4 脱颖而出 2026-03-16 11/550 2026-03-19 08:11 by 脱颖而出
[考研] 一志愿华中科技大学，080502，354分求调剂 +4 守候夕阳CF 2026-03-18 4/200 2026-03-18 22:16 by li123456789.
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +5 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 6/300 2026-03-18 17:53 by 无际的草原
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +7 步川酷紫123 2026-03-13 7/350 2026-03-18 17:12 by 尽舜尧1
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +5 梨花珞晚风 2026-03-17 5/250 2026-03-18 14:49 by haxia
[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +4 ioodiiij 2026-03-17 4/200 2026-03-18 12:36 by Linda Hu
[考研] 280求调剂 +6 咕噜晓晓 2026-03-18 7/350 2026-03-18 11:25 by 无际的草原
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林，给自己招师弟中～ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +8 一鸭鸭哟 2026-03-14 10/500 2026-03-17 15:07 by 一鸭鸭哟
[考研] 321求调剂 +5 大米饭！ 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考博] 东华理工大学化材专业26届硕士博士申请 +6 zlingli 2026-03-13 6/300 2026-03-15 20:00 by ryzcf
[考研] 288求调剂 +4 奇点0314 2026-03-14 4/200 2026-03-14 23:04 by JourneyLucky
[考研] 复试调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 5/250 2026-03-14 16:30 by JourneyLucky
[考博] 福州大学杨黄浩课题组招收2026年专业学位博士研究生，2026.03.20截止 +3 Xiangyu_ou 2026-03-12 3/150 2026-03-13 09:36 by duanwu655
[考研] 321求调剂（食品/专硕） +3 mxcz321 2026-03-12 6/300 2026-03-13 08:45 by xc321
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭