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myfriendtl

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助,跪求分析下PCR失败原因

跪求高手指点一下,为什么我的PCR产物电泳图这个样子。引物是通用引物27F和1492r
体系25ul,buffer:2.5,dntp:2,引物:0.5,模板0.5,taq酶天根的(5U)0.2ul
预变性94℃,4min
变性94℃,40s
退火56℃,1min
延伸72℃,1.5min
三十个循环
之后72℃,10min

Administrator 2013-01-09 15 小时 37 分钟.jpg
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myfriendtl

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by reninhat at 2013-01-16 15:14:45
没有荧光扩增图么?光看电泳图不好分析啊

没有啊,pcr这东西我也是刚做,结果各种问题
4楼2013-01-16 15:22:07
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查看全部 13 个回答

reninhat

铁杆木虫 (正式写手)

没有荧光扩增图么?光看电泳图不好分析啊
2楼2013-01-16 15:14:45
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121however

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2013-01-16 20:28:12
amisking: 回帖置顶 2013-01-16 20:28:14
看你的marker应该是胶的问题吧,重新做个胶试试,加上eb后一定要混匀。另外退火时间是不是有点长啊
3楼2013-01-16 15:22:06
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用的什么模板,是不是用量太大了。条带是要扩增的片段大小吗?
5楼2013-01-16 16:13:24
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