应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR失败了一次又一次了啊
211/3返回列表123下一页
查看: 1716  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

可可猫

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR失败了一次又一次了啊 已有18人参与

刚刚开始做PCR的时候，简直是RP大爆发，每次都能P出来。

结果近一个月，东西完全一样，却完全P不出来了，Maker都跑得出来。
本来以为是taq酶失活了，买了新的，还是P不出来。TAE用的也是新鲜的。准备重新稀释一管模板来用看看。
求助各位师兄师姐，一般P不出来还有那些没考虑到呢。
~~~~(>_<~~~~
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2010-07-22 14:09:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunyongle1

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-07-23 07:00:26
marker跑出来了就不是跑胶的问题。
模板有没有讲解？PCR仪的问题（原来我们实验室有次就是PCR仪的控温系统出问题了）？引物是不是错了等等，说不定 哪里出了点小问题。呵呵，没准是粗心闹得
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-07-22 14:13:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wordsworth3180

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-07-23 07:00:33
引物是不是反复冻融而降解了？重新用储液稀释试试
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2010-07-22 14:14:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

love_st

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
肯定是你的某个小环节出现纰漏，回去仔细查下，应该不难找出原因
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-07-22 14:18:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cty1984

木虫 (著名写手)

小书童
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
对照刚开始做的，把每一个细节对照一下，PCR就是这样，一点粗心就可能产生很大问题
赞一下(1人) 回复此楼
坚持就是胜利！
5楼2010-07-22 14:28:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

可可猫

铜虫 (小有名气)
引物反复冻融会降解咩？可是保存在-20℃，每次用都是要融化的啊，疑惑中....
引物应该是不会错的，之前P得挺好的，都是同一批

上面有TX提到机器问题，我们确实是才换了PCR仪，我也确实是换了仪器之后做不出来，但是其他人的能出来，代表不是仪器的问题吧？
~~~~(>_<~~~~
至于是不是粗心.....我已经P到要吐了，每一步都很小心的，应该不是很可能吧....
赞一下 回复此楼
6楼2010-07-22 14:31:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunyongle1

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
模板最容易出问题了，那就看看模板吧
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2010-07-22 15:18:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cthgj

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引物问题吧。。。。
回复此楼
8楼2010-07-22 22:00:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangleisdnu

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dNTP?
Mg2+ CONCENTRATION?
PCR machines? did your colleague work well with this machine? let the other people do one time for you
did you get primer dimers?
赞一下(1人) 回复此楼
有勇气去改变你可以改变的,有度量去容忍你不能改变的,有智慧去区分上面的两种情况http://bbs.bioon.net/bbs/?66210
9楼2010-07-22 22:09:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoshch26
lstt09nk:交流贴请勿纯表！！ 2010-07-23 11:14:52
10楼2010-07-22 22:24:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 可可猫 的主题更新
211/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +13 enenenhui 2026-03-13 14/700 2026-03-16 15:19 by 了了了了。。
[考研] 材料与化工求调剂 +3 为学666 2026-03-16 3/150 2026-03-16 15:09 by 加号+
[考研] 环境工程调剂 +4 大可digkids 2026-03-16 4/200 2026-03-16 14:00 by laoshidan
[考研] 材料专硕306英一数二 +4 z1z2z3879 2026-03-16 4/200 2026-03-16 13:53 by laoshidan
[考研] 274求调剂 +4 时间点 2026-03-13 4/200 2026-03-15 15:29 by Rambo13
[考研] 中科大材料专硕319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-13 3/150 2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +7 邱gl 2026-03-10 11/550 2026-03-14 12:18 by 邱gl
[考研] 085600求调剂 +3 a邵星池 2026-03-09 3/150 2026-03-14 01:32 by JourneyLucky
[考研] 295复试调剂 +5 简木ChuFront 2026-03-09 5/250 2026-03-14 01:29 by JourneyLucky
[考研] 306求调剂 +4 唐薏薏 2026-03-09 4/200 2026-03-14 01:19 by JourneyLucky
[考研] 一志愿安徽大学材料工程专硕313分，求调剂的学校 +8 Yu先生 2026-03-10 10/500 2026-03-14 01:04 by JourneyLucky
[考研] 312求调剂 +6 陌宸希 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:40 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中农业大学071010，总分三百二,求调剂 +3 困困困困坤坤 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:35 by JourneyLucky
[考研] 材料工程,326分，求调剂 +6 KRSLSR 2026-03-10 6/300 2026-03-13 23:47 by JourneyLucky
[考研] 0805，333求调剂 +3 112253525 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:42 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +5 邱gl 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:37 by JourneyLucky
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +6 步川酷紫123 2026-03-13 6/300 2026-03-13 21:59 by 星空星月
[考研] 332求调剂 +3 Zz版 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:36 by 18595523086
[考研] 302求调剂 +6 负心者当诛 2026-03-11 6/300 2026-03-13 16:11 by JourneyLucky
[考研] 求调剂材料专硕293 +6 段_(:з」∠)_ 2026-03-10 6/300 2026-03-10 18:22 by ms629
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭