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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR失败了一次又一次了啊
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可可猫

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR失败了一次又一次了啊 已有18人参与

刚刚开始做PCR的时候，简直是RP大爆发，每次都能P出来。

结果近一个月，东西完全一样，却完全P不出来了，Maker都跑得出来。
本来以为是taq酶失活了，买了新的，还是P不出来。TAE用的也是新鲜的。准备重新稀释一管模板来用看看。
求助各位师兄师姐，一般P不出来还有那些没考虑到呢。
~~~~(>_<~~~~
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1楼 2010-07-22 14:09:58
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cthgj

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引物问题吧。。。。
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8楼2010-07-22 22:00:51
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sunyongle1

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-07-23 07:00:26
marker跑出来了就不是跑胶的问题。
模板有没有讲解？PCR仪的问题（原来我们实验室有次就是PCR仪的控温系统出问题了）？引物是不是错了等等，说不定 哪里出了点小问题。呵呵，没准是粗心闹得
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-07-22 14:13:44
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-07-23 07:00:33
引物是不是反复冻融而降解了？重新用储液稀释试试
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2010-07-22 14:14:30
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love_st

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
肯定是你的某个小环节出现纰漏，回去仔细查下，应该不难找出原因
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-07-22 14:18:35
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