| 查看: 1961 | 回复: 2 | ||
[求助]
]overlap PCR做不出来
|
|
小虫做重叠pcr连接两个片段 1、分别扩增两个片段，退火温度为60 大小为945bp 950bp 纯化后备用 2、以纯化后的两个片段为模板，以前面片段的5‘端引物和后面片段的3’端引物来进行重叠PCR。重叠区24bp .第一次连接上了退火温度60，可之后怎么也连不上了，也做退火梯度，模板也稀释做过梯度了，酶也换过了，怎么办？ 体系是：50ul Buffer 5 条件是：初始变性 95 6min dNTP（10mM） 4 变性 98 30s primerA 1 退火 58/60 30s primerB 1 延伸 72 30s TemplateA 1.5 25cycle templateB 1.5 最终延伸 72 10min Enzyme tag-T 1 |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有211人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 反向PCR扩不出来
已经有4人回复
- 进行overlap pcr，结果不仅没有目的片段，跑胶的条带都比模板长度还短
已经有3人回复
- 模版GC含量高，二级结构复杂，PCR扩不出来
已经有5人回复
- 融合PCR详细步骤
已经有8人回复
- 为什么同样的PCR条件结果重复不出来呢，P出来一次之后就P不出来了
已经有22人回复
- 为什么PCR跑出来是这样的
已经有19人回复
- P不出来目的条带，求help
已经有4人回复
- 菌液pcr总是做不出！求高手解答！
已经有18人回复
- 设计了简并引物，PCR扩不出条带
已经有9人回复
- 融合PCR最后一步做不出来，求救！！！
已经有23人回复
- 我想做3个基因的overlap pcr ，不知怎样做才好
已经有7人回复
- 克隆做不出来，求帮助
已经有19人回复
- PCR不出目的条带的原因
已经有12人回复
- 求关于Overlap PCR(重叠延伸PCR)的具体实验过程及原理
已经有10人回复
- 不同的MIX做PCR为什么得到不同的结果？
已经有6人回复
- OVER-LAP PCR第二轮扩增不出来条带
已经有6人回复
- overlap PCR之问题
已经有16人回复
- PCR样品不在一块胶上，怎么统计条带啊，烦的要死
已经有11人回复
- overlap PCR做不出来呐。。。。
已经有23人回复
- pcr一直不出结果，可以从哪些方面调整
已经有13人回复
- 做过overlap PCR的虫子过来看看
已经有19人回复
- 做过用同源重组进行基因敲出的朋友请进，PCR做不出来！！
已经有16人回复
- 重叠PCR应该怎么做？
已经有9人回复
- PCR扩增不出条带
已经有9人回复
Renavatio
木虫 (小有名气)
- 应助: 25 (小学生)
- 金币: 1312.6
- 散金: 50
- 红花: 2
- 帖子: 138
- 在线: 131.8小时
- 虫号: 1416599
- 注册: 2011-09-25
- 性别: GG
- 专业: 基因组学
青与青松2楼2013-01-15 14:15:35
3楼2013-01-15 14:45:40