24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3045  |  回复: 5

fanwq258

木虫 (正式写手)

[求助] 模版GC含量高,二级结构复杂,PCR扩不出来 已有1人参与

如题,我的两个基因GC含量74%,75%左右,75%的扩出来了,但是74%这个怎么弄也扩不出来,用的TAKARA的primestar HS with GC buffer。 二级结构预测用的RNA structure 。
模版GC含量高,二级结构复杂,PCR扩不出来
图片1.png

[ Last edited by fanwq258 on 2014-3-7 at 10:04 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

要么好好活,要么死,拒绝半死不活
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangyunjing

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 应助指数+1, 鼓励回帖交流 2014-03-07 13:38:51
可能是引物设计的不是很好,在退火温度条件下预测一些你的目的片段的二级结构,设计引物时尽量避开这些二级结构。另外,我用sangon的高GC的Mix扩增出GC%为78%的片段,如果引物设计没有问题,不妨换一下产品试试
rainwater
2楼2014-03-07 11:27:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

平凡乌托邦

铁虫 (正式写手)

加DMSO和甘油试试!
理想很丰满,现实很骨感
3楼2014-03-09 17:10:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小尾巴亚杰

金虫 (小有名气)

我用PrimerSTAR和他的GCbuffer扩,把退火温度调到60度,你在试试,有时候加一些DMSO,Mg离子,效果也是不错的
4楼2014-03-11 15:51:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fanwq258

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 小尾巴亚杰 at 2014-03-11 15:51:56
我用PrimerSTAR和他的GCbuffer扩,把退火温度调到60度,你在试试,有时候加一些DMSO,Mg离子,效果也是不错的

你是说三步法吗?
要么好好活,要么死,拒绝半死不活
5楼2014-03-11 22:27:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小尾巴亚杰

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by fanwq258 at 2014-03-11 22:27:29
你是说三步法吗?...

是的
6楼2014-03-12 10:34:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fanwq258 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿华中农业大学0710(A)初试329分 求调剂 +4 一名26考研生 2026-04-04 4/200 2026-04-05 10:01 by barlinike
[考研] 化学357分,考研调剂 +9 .Starry. 2026-04-04 10/500 2026-04-05 09:46 by MinkyXMQ
[考研] 322求调剂:一志愿湖南大学 材料与化工(085600),已过六级。 +16 XX小邓 2026-03-29 18/900 2026-04-05 08:20 by gaoxiaoniuma
[考研] 一志愿南航,数一英一学硕317求调剂!! +3 Acaciad 2026-04-04 3/150 2026-04-04 22:29 by lbsjt
[考研] 333求调剂 +12 wfh030413@ 2026-04-03 13/650 2026-04-04 21:02 by jj987
[考研] 求调剂:085600材料与化工,考材科基,总分319 +21 678lucky 2026-03-31 26/1300 2026-04-04 16:22 by dongzh2009
[考研] 265求调剂 +17 林深温澜 2026-04-01 20/1000 2026-04-04 01:09 by userper
[考研] 311求调剂 +11 勇敢的小吴 2026-04-02 11/550 2026-04-03 21:46 by qlm5820
[考研] 085600专硕材料与化工348分求调剂 +10 上学啦! 2026-04-01 11/550 2026-04-03 14:13 by 百灵童888
[考研] 282求调剂 不挑专业 求收留 +7 Yam. 2026-03-30 8/400 2026-04-03 14:12 by zhangdingwa
[考研] 071000生物学调剂 +8 知昭蔓 2026-04-02 8/400 2026-04-03 10:36 by macy2011
[考研] 279求调剂 +6 qazplm0852 2026-04-02 6/300 2026-04-03 10:03 by 蓝云思雨
[考研] 325分化学调剂 +5 15771691647 2026-04-02 5/250 2026-04-03 09:58 by ChemPharm
[考研] 346求调剂 +5 郑诚乐 2026-04-02 5/250 2026-04-02 16:38 by SZW_UJN
[考研] 一志愿安徽大学计算机科学与技术学硕,331分求调剂 +5 蒋昌鹏qtj 2026-04-01 5/250 2026-04-02 08:10 by fxue1114
[考研] 298求调剂 +4 什么是胖头鱼 2026-03-30 6/300 2026-04-01 22:06 by 客尔美德
[考研] 286求调剂 +5 Sa67890. 2026-04-01 7/350 2026-04-01 19:50 by 6781022
[考研] 350求调剂 +7 阿佳~ 2026-03-31 7/350 2026-04-01 16:12 by yanflower7133
[考研] 省双一流重点一本大学招收调剂 +4 wwwwffffff 2026-03-31 7/350 2026-04-01 15:23 by wwwwffffff
[考研] 085600,321分求调剂 +13 大馋小子 2026-03-31 13/650 2026-04-01 12:35 by chemdavid
信息提示
请填处理意见