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[交流]
【求助/交流】低GC含量的模板设计引物 已有6人参与
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| 本人最近要做一个基因的互补，用CDNA为模板区扩增该基因的CDS，但是设计的引物一直扩不出来，我不停的更换引物，加大长度，提高TM值等，但是没有收到有效的结果，扩增的特意性很差。后来我发现我的模板的GC含量比较低，不到30%。设计引物的TM值也不高，我尝试在酶切微点的额保护碱基处多加几个GC，也不行。对于GC含量低的模板，大家有什么好方法得到比较特异的扩增吗？ |
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