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【求助/交流】低GC含量的模板设计引物 已有6人参与
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| 本人最近要做一个基因的互补,用CDNA为模板区扩增该基因的CDS,但是设计的引物一直扩不出来,我不停的更换引物,加大长度,提高TM值等,但是没有收到有效的结果,扩增的特意性很差。后来我发现我的模板的GC含量比较低,不到30%。设计引物的TM值也不高,我尝试在酶切微点的额保护碱基处多加几个GC,也不行。对于GC含量低的模板,大家有什么好方法得到比较特异的扩增吗? |
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3楼2010-05-05 08:34:20
4楼2010-05-05 14:36:58
5楼2010-05-05 14:53:07
liyong1981
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7楼2010-05-05 15:49:02
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