| 查看: 973 | 回复: 6 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
冰凝草木虫 (小有名气)
|
[求助]
不知道为什么用猪的肠道的cDNA 一直都无法PCR出目的条带
|
|
|
最近一直在努力从猪的肠道的cDNA 中PCR出目的条带，是APN这个基因的条带，一开始的时候是使用的DNA，但是由于设计的引物是以mRNA为依据的，所以后来开始换用RNA反转录形成的cDNA，目的条带不是很大，只有3Kb左右，是一开始设计的全长的引物，但是没有结果，所以设计了两段只有500bp 大小的引物，都成功的PCR出目的条带了，鉴定也是对的，所以就又重新设计两段1.5Kb 的引物，为了做重叠PCR，但是还是没有结果。 最后设计的引物的上下游的Tm值相差较大，但是试了48、53、55、57、59之后都是没有条带，不知道是什么原因呢？ |
回复此楼» 猜你喜欢
272求调剂
已经有3人回复
-
317一志愿华南理工电气工程求调剂
已经有5人回复
-
化工专硕348，一志愿985求调剂
已经有6人回复
-
292求调剂
已经有3人回复
-
304求调剂
已经有4人回复
-
290求调剂
已经有6人回复
-
295求调剂
已经有5人回复
-
26申博
已经有4人回复
-
材料学调剂
已经有5人回复
-
264求调剂
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 为什么用cDNA做模板的PCR感觉很不稳定啊
已经有8人回复
- 求助大神们 CDNA片段PCR扩增之后没有目的条带 全是拖带
已经有11人回复
- 求助！新人，融合PCR一直融不上！！！
已经有24人回复
- 反转录一直不成功
已经有18人回复
- RT-PCR实验中，要获得双链cDNA时，需不需要去除混合的RNA？
已经有4人回复
- 反转录的cDNA没问题，但是实时定量PCR却不行。内参扩不出来啊。
已经有8人回复
- 急求，pcr扩增cDNA时扩增出了基因组的片段。接下来该怎么办。
已经有4人回复
- SYBR 荧光定量PCR 阴性对照问题
已经有7人回复
- PCR重复不出来
已经有7人回复
- PCR出现的条带不清晰，拖带。请教中~~
已经有3人回复
- 16srRNA基因PCR扩增条带总出现在最下方什么原因？
已经有13人回复
- 反转录后扩增有好几条带
已经有8人回复
- 半定量RT-PCR电泳条带越来越浅
已经有5人回复
- 关于PCR，跑胶，求分析胶片
已经有39人回复
- PCR试剂盒的使用期限问题（PCR试剂过期问题）
已经有11人回复
- RT-PCR的cDNA不能扩增出目的条带，只有内参基因能扩增出来
已经有14人回复
- 【求助】用cDNA的ORF序列以基因组DNA为模板 做PCR 为何P不出其对应的基因组序列?
已经有8人回复
- rt-pcr图，请大神们帮助分析一下，急。。。谢谢。。。
已经有20人回复
- cDNA做普通PCR扩不出条带来
已经有13人回复
- 【求助/交流】跪求反转录失败的原因
已经有16人回复
- 【求助/交流】以cDNA为模板PCR扩增目的片段时条带较浅原因
已经有13人回复
- 【分享】realtime pcr 个人经验分享
已经有41人回复
joan198108
铁杆木虫 (正式写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 107 (高中生)
- 金币: 6525.2
- 散金: 12
- 红花: 3
- 帖子: 842
- 在线: 413.5小时
- 虫号: 859607
- 注册: 2009-09-29
- 性别: GG
- 专业: 生物技术药物
3楼2012-12-31 10:07:29
yixuanwin
铁杆木虫 (正式写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 22 (小学生)
- 贵宾: 0.001
- 金币: 5937.7
- 红花: 1
- 帖子: 431
- 在线: 40.2小时
- 虫号: 719137
- 注册: 2009-03-10
- 性别: GG
- 专业: 基因组学
2楼2012-12-30 14:53:28
冰凝草
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 12815.9
- 散金: 4
- 帖子: 232
- 在线: 383.4小时
- 虫号: 1738291
- 注册: 2012-04-05
- 性别: MM
- 专业: 免疫学研究新技术与新方法
4楼2012-12-31 17:10:05
lihegang2000
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 6452.8
- 散金: 300
- 红花: 4
- 帖子: 631
- 在线: 377.6小时
- 虫号: 311541
- 注册: 2006-12-30
- 性别: GG
- 专业: 免疫遗传学
5楼2012-12-31 19:00:13
