| 查看: 2628 | 回复: 24 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
连接！转化！出问题了！！！！
|
|||
|
我做的连接转化，后提质粒，利用T载体鉴定试剂盒检测，如图。 目的基因大约是2000bp，连接载体是Promoge载体pGEM-T载体，转化菌株是JM109菌种 连接后，冻融法转化JM109，涂Amp，IPTG, X-gal 平板。 问题1. 出现了，平板全是白斑没有蓝斑！！（Promoge载体自连很严重，但却没有了，而且前段时间是有蓝白斑的，就在这一个月没有蓝斑只有白斑，不但我的实验是这样，整个实验室全是白斑，没有蓝斑） 问题2. 我提质粒显示确是1500的条带（载体大约3000bp），目的基因PCR检测是空白，证明是空载体！！用T载体鉴定试剂盒检测（SP6/T7引物检测）的确是空载体（250bp左右），也同样可以排除1500是细菌基因组DNA的可能性。 求解！！！    212.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
氢氧化钾活化操作
已经有19人回复
-
散金
已经有68人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有121人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 3Kbp片段转化连接问题
已经有6人回复
- 求助-基因的突变文库相关问题
已经有7人回复
- 克隆出问题了，大家帮忙分析下
已经有15人回复
- 双酶切，连接，转化问题
已经有30人回复
- 为什么最近做连接转化总是失败
已经有20人回复
- 连接与转化问题
已经有5人回复
- 连接转化问题很烦呀。。
已经有14人回复
- 请教一下连接与转化问题！
已经有11人回复
- 连接转化不成功问题
已经有17人回复
- 目的基因连接pGEX-6p-1进行转化的问题
已经有14人回复
- 胶回收产物连接转化后菌液PCR电泳条带出现问题
已经有8人回复
- 【求助/交流】关于酶切连接转化的问题
已经有10人回复
- 【求助/交流】连接转化时遇到的奇怪问题 求解
已经有12人回复
- 【求助/交流】连接转化长菌有质粒，但是没有目的片段，怎么回事？？
已经有20人回复
- 【求助/交流】请教连接转化方面的问题
已经有14人回复
- 【求助/交流】大片段连接转化成功与否问题
已经有11人回复
- 【求助/交流】蓝白斑筛选什么也不长
已经有16人回复
9楼2012-12-19 17:33:30
2楼2012-12-19 15:05:09
3楼2012-12-19 15:51:49
4楼2012-12-19 16:21:19
10