24小时热门版块排行榜    

查看: 1992  |  回复: 13

Cllair

金虫 (小有名气)

[求助] 质粒测序后发现有重叠现象

之前将克隆的基因直接送测序一直说有重叠现象得不到测序结果。上次将转化后的大肠杆菌提取质粒送测序,结果还是有重叠现象。。。有点濒临崩溃的边缘,十分想请教各位虫友,大家有没有遇到过类似的情况,怎么解决的啊。
还有就是我想着直接送转化后的大肠杆菌去测序,之前查过资料说菌样测序的话结果可能不如质粒好。。。能给点相关的建议不?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

有今生没来世,且行且珍惜。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果质粒没有提好会影响测序结果。首先确定一定要挑单克隆。有时候两个克隆靠在一起的不要用。筛到了阳性克隆,可以直接送菌液测序。
2楼2012-12-19 09:07:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuding6

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
多换几个公司测试试
3楼2012-12-19 10:43:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Cllair

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-19 09:07:45
如果质粒没有提好会影响测序结果。首先确定一定要挑单克隆。有时候两个克隆靠在一起的不要用。筛到了阳性克隆,可以直接送菌液测序。

我这次把之前单克隆影印的菌落摇菌送测序的应该没问题吧?其实我一直都调单菌落的,这个基因自从在我师姐手里的时候就测序过很多次,一直因为重叠没有得到序列,我都开始怀疑这个基因本身有问题了。。。
有今生没来世,且行且珍惜。
4楼2012-12-19 11:11:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Cllair

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by fuding6 at 2012-12-19 10:43:11
多换几个公司测试试

我们一直都在生工测序,请问你有什么比较给力的公司可以推荐吗?
有今生没来世,且行且珍惜。
5楼2012-12-19 11:17:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

btx362237729

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
invitrogen的测序还是不错的
人生最黑暗的时光终于过去了
6楼2012-12-19 16:18:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小丹木木

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你送菌测序前,最好把菌纯化一下
7楼2012-12-19 17:28:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liguanying

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果用的通用引物测序,你向测序公司要一下,他们测序用的引物,然后和你的基因序列比对一下。看看是不是和你的基因序列有同源性。如果你用的是自己的基因引物测序,看一下你的引物是不是特异性不好。
8楼2012-12-19 18:50:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Cllair

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by btx362237729 at 2012-12-19 16:18:37
invitrogen的测序还是不错的

谢谢,我会考虑把换测序公司作为备选。
有今生没来世,且行且珍惜。
9楼2012-12-20 09:26:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Cllair

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 小丹木木 at 2012-12-19 17:28:24
你送菌测序前,最好把菌纯化一下

得人指点,我正在做纯化,谢谢
有今生没来世,且行且珍惜。
10楼2012-12-20 09:26:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Cllair 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 299求调剂 +5 △小透明* 2026-03-17 5/250 2026-03-18 11:49 by 尽舜尧1
[考研] 280求调剂 +6 咕噜晓晓 2026-03-18 7/350 2026-03-18 11:25 by 无际的草原
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
[考研] 328求调剂,英语六级551,有科研经历 +3 生物工程调剂 2026-03-16 8/400 2026-03-17 19:03 by Wangjingyue
[考博] 26申博 +4 八旬速览 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
[考研] 283求调剂 +3 听风就是雨; 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:41 by 热情沙漠
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 318求调剂 +3 Yanyali 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:41 by houyaoxu
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:58 by 漾漾123sun
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化,一志愿:哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-03-13 4/200 2026-03-14 08:37 by zhukairuo
[考研] 0856材料与化工301求调剂 +5 奕束光 2026-03-13 5/250 2026-03-13 22:00 by 星空星月
[考研] 329求调剂 +3 miaodesi 2026-03-12 4/200 2026-03-13 20:53 by 18595523086
[考研] 求调剂 +3 程雨杭 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:06 by JourneyLucky
[考研] 085600材料与化工 309分请求调剂 +7 dtdxzxx 2026-03-12 8/400 2026-03-13 14:43 by jxchenghu
[考研] 材料301分求调剂 +5 Liyouyumairs 2026-03-12 5/250 2026-03-13 14:42 by JourneyLucky
[论文投稿] 投稿问题 5+4 星光灿烂xt 2026-03-12 6/300 2026-03-13 14:17 by god_tian
信息提示
请填处理意见