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木虫懒

铜虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE蛋白电泳问题

新人求助(金币不多,请谅解)
    电泳的条带总是很粗,好像是拖尾特别严重。
    浓缩胶5%,电压60V;分离胶20%,电压100V。缓冲液都是用的新的。要怎么把下面两条带分开,或者让条带变聚集一点呢?
    条带大小分别是7.7和10.1.

条带大小分别是7.7和10.1.



中间两道最下面应该也是分开的两条带,现在也分不开。上面那张图就是第二道的样品,稀释不同浓度跑出来的。
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木虫懒

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Champanzee at 2012-12-10 09:18:50
我也遇到了相同的情况,条带拖尾,你这个为题解决了吗,求高人指点

试过加尿素的,没什么变化,现在试Tricine胶中。
5楼2012-12-11 18:19:56
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
木虫懒: 金币+2, ★★★很有帮助, 非常感谢,头一次求助,外行啥都不懂,谢谢你的认真帮助。尝试一下你的建议,有问题还要继续请教哈。 2012-12-04 16:39:01
你的蛋白疏水性强吗?如果是的话,跑成有点弥散状是正常的。你可以在胶和样品中加6M尿素,对膜蛋白和小分子量区域的分辨率有所提高。不行的话跑Tricine胶,小分子量蛋白分离效果好。
2楼2012-12-04 15:07:24
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Champanzee

新虫 (初入文坛)

我也遇到了相同的情况,条带拖尾,你这个为题解决了吗,求高人指点
没有做不到只有想不到
4楼2012-12-10 09:18:50
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