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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 垂直板电泳图谱，大家给看看是怎么回事啊？急死了！
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fochao

禁虫 (著名写手)
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1楼2012-10-31 08:08:33
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

jiangyinshen

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
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fochao: 金币+1 2012-11-02 20:29:04
DNA最好还是用琼脂糖胶跑，水平电泳比较靠谱，你换成大板子，上样量加倍不就行了
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不是風動，亦非幡動，仁者心動
7楼2012-10-31 12:55:38
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普通回帖

lidonghong

金虫 (正式写手)
弱弱的问一句，你这跑的是DNA吗？
产物看似好像有点降解呀！能用水平电泳不。
还有你这跑的时间老长了，我不管是水平还是垂直都没有跑4小时啊！
不了解啊！
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生物化学与分子生物学
2楼2012-10-31 08:24:41
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fochao

禁虫 (著名写手)
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3楼2012-10-31 09:32:48
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huangguoqing

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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fochao: 金币+3, ★有帮助 2012-10-31 10:55:17
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-10-31 15:19:48
个人建议，仅供参考！
1.loading buffer上的也太多了吧，buffer的终浓度最好为1X；
2.如果可以，建议更换较少泳道的梳子，分几块胶，那样结果会好很多，个人经验；
3.避免边缘效应，胶的边缘孔尽量不要上样或上适当的稀释为1Xloading buffer；
4.看你的泳道里面DNA条带很杂，如果一些较淡的条带不是你想要的，建议可以用银染方法试试。
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4楼2012-10-31 10:23:19
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wind1234hh

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
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fochao: 金币+2, ★有帮助 2012-10-31 12:39:20
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-31 15:19:58
Marker最好不要放在边上，确实存在边缘效应，一般Marker可以放在中间位置，也便于对比。
凝胶时间可以再适当延长，使胶板完全凝聚，制板时注意避免气泡。
楼主好像整块板都是分离胶吧？是否有必要再加上一层浓缩胶
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5楼2012-10-31 11:03:25
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fochao

禁虫 (著名写手)
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6楼2012-10-31 12:39:43
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review

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
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fochao: 金币+1 2012-11-02 20:30:10
是你的胶凝得早了！
少加点AP   或者你灌胶和插梳子动作快点！
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交流
8楼2012-10-31 13:34:07
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star20089286

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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fochao: 金币+1 2012-10-31 16:19:24
fochao: 金币+1 2012-11-02 20:30:14
换TBE缓冲液，增大电压，硝酸银染色
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9楼2012-10-31 13:55:15
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jl860822

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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fochao: 金币+1, 水平板分辨率低啊，有的很近的小条带就看不到了啊！ 2012-11-02 20:30:50
水平板应该是可以的吧，配长胶，跑时间长一点，肯定没问题的，而且出现问题后，比较容易分析原因
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10楼2012-11-02 09:04:14
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