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wang@香新虫 (初入文坛)
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[求助]
大家帮我看看我最近做的pcr电泳图
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我最近做了同科不同种植物的issr，下面是我pcr电泳图的结果，我想请问大家我的图为什么条带这么多，但是却不亮，而且弥散严重啊，最近做了很多引物，很多能扩增的引物做出来都是这样的效果，谢谢大家！ 电泳图 |
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 基因工程、分子技术、微生物理论 |
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2楼2012-08-18 09:02:48
3楼2012-08-18 14:31:42
xuyihui2001
银虫 (正式写手)
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- 专业: 生物大分子结构与功能
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条带多是正常的呀。（ISSR(inter-simple sequence repeat)是Zietkeiwitcz等于1994年发展起来的一种微卫星基础上的分子标记。其基本原理是:用锚定的微卫星DNA为引物，即在SSR序列的3'端或5'端加上2-4个随机核苷酸，在PCR反应中，锚定引物可引起特定位点退火，导致与锚定引物互补的间隔不太大的重复序列间DNA片段进行PCR扩增。所扩增的inter SSR区域的多个条带通过聚丙烯酞胺凝胶电泳得以分辨，扩增谱带多为显性表现。 ISSR引物的开发不像SSR引物那样需测序获得SSR两侧的单拷贝序列，开发费用降低。与SSR标记相比，ISSR引物可以在不同的物种间通用，不像SSR标记一样具有较强的种特异性;与RAPD和RFLP相比，ISSR揭示的多态性较高，可获得几倍于RAPD的信息量，精确度几乎可与RFLP相媲美，检测非常方便，因而是一种非常有发展前途的分子标记。目前，ISSR标记已广泛应用于植物品种鉴定、遗传作图、基因定位、遗传多样性、进化及分子生态学研究中。 只调高退火温度，最后一轮延伸时间长达10-20分钟，产物扩增完全就不会有弥散了。 |
4楼2012-08-19 09:23:50
wang@香
新虫 (初入文坛)
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- 专业: 植物分类学
5楼2012-08-19 10:07:41
