应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于菌落pcr
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
131/1返回列表
查看: 997  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

hezhihao_333

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于菌落pcr

最近在做最基础的连接转化，每次转化后，氨苄板上也长菌，挑去单个菌落摇菌，做菌液pcr，出来的片段与目的片段大小有差别，我要的是1000bp左右的，但出来的却是700bp左右的，而且如果电泳时间长了的话，条带也没有了，各位帮帮忙，看看是什么情况？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-08-10 23:35:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hzlatqh

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
电泳时间长了条带会不见？这是什么道理。。。
赞一下 回复此楼
2楼2012-08-11 09:02:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

damaomao

禁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
3楼2012-08-11 09:04:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

damaomao

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
4楼2012-08-11 09:05:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王贤卓

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hzlatqh at 2012-08-11 09:02:44
电泳时间长了条带会不见？这是什么道理。。。

pcr产物跑到底了。。
赞一下 回复此楼
5楼2012-08-11 10:34:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lillian菲

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-13 15:02:49
你好，请问你做的转化长菌，有没有涂X-gal和IPTG做蓝白斑筛选了吗？说不定你挑的是假阳性单菌落
还有PCR电泳时可换个比较指示性比较清楚的Marker，也有可能是电泳不准确的原因，可以送去测序看看，这个比较准确
赞一下 回复此楼
6楼2012-08-11 15:31:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hzlatqh

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 王贤卓 at 2012-08-11 10:34:15
pcr产物跑到底了。。...

这。。。随便一个东西跑久了也会跑出去的。。。原帖这样写会误导的。。。
赞一下 回复此楼
7楼2012-08-11 17:51:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zy晨曦

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
建议你改一下胶的浓度
赞一下 回复此楼
8楼2012-08-11 18:12:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sd3824289

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
700bp的片段用1%的凝胶就可以的！至于片段大小不对，我建议再挑选几个克隆看看！一般出现这种情况的概率不太大！
赞一下 回复此楼
10楼2012-08-12 08:44:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chicharito

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
把700bp的条带送去测序，看看是什么东西。
赞一下 回复此楼
11楼2012-08-12 17:02:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

angie8610

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可能是连接的片段不对吧，做PCR检测有一点不准确，建议做酶切！
赞一下 回复此楼
12楼2012-08-13 09:40:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sarah-miao

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你再酶切看看，能不能出现连接的两个条带呢，酶切最保险了
赞一下 回复此楼
13楼2012-08-13 10:18:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
zy晨曦9楼
2012-08-11 19:00   回复  
相关版块跳转 我要订阅楼主 hezhihao_333 的主题更新
131/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600 一志愿9 总分351 求调剂学校 +7 czhcz 2026-03-31 7/350 2026-03-31 18:54 by 小张做实验
[考研] 086000调剂 +5 7901117076 2026-03-26 5/250 2026-03-31 17:45 by 544594351
[考研] 328求调剂 +5 鹏鹏碰嘭嘭 2026-03-24 5/250 2026-03-31 17:42 by 544594351
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +28 RichLi_ 2026-03-25 36/1800 2026-03-31 14:56 by JourneyLucky
[考研] 347求调剂 +11 山顶见α 2026-03-25 11/550 2026-03-31 14:14 by 记事本2026
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +6 hanamiko 2026-03-30 6/300 2026-03-31 12:19 by 唐沐儿
[考研] 一志愿北化085600材料专硕275|有文章专利｜求调剂 +15 Micky11223 2026-03-25 16/800 2026-03-31 12:15 by oooqiao
[考研] 274求调剂 +6 xiao爱同学 2026-03-30 6/300 2026-03-31 10:04 by cal0306
[考研] 070300化学279求调剂 +7 哈哈哈^_^ 2026-03-31 9/450 2026-03-31 10:02 by cal0306
[考研] 08工科求调剂286 +5 tgs_001 2026-03-28 5/250 2026-03-31 08:18 by 一只好果子?
[考研] 085602化工求调剂（331分） +8 111@127 2026-03-30 8/400 2026-03-30 21:23 by 研究僧导导
[考研] 303求调剂 +7 DLkz1314. 2026-03-30 7/350 2026-03-30 21:07 by peike
[考研] 293求调剂 +3 末未mm 2026-03-30 5/250 2026-03-30 17:23 by 王保杰33
[考研] 332求调剂 +6 Lyy930824@ 2026-03-29 6/300 2026-03-30 10:53 by 1172367218
[考研] 一志愿双一流机械285分求调剂 +4 幸运的三木 2026-03-29 5/250 2026-03-29 14:49 by Miko19
[考研] 298求调剂 +4 种圣赐 2026-03-28 4/200 2026-03-29 08:42 by q1092522407
[考研] 321求调剂 +7 璞玉~~ 2026-03-25 8/400 2026-03-29 06:41 by 544594351
[考研] 复试调剂 +3 raojunqi0129 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:27 by 落睿可思
[考研] 一志愿厦门大学化学学硕307求调剂 +10 y7czhao 2026-03-26 10/500 2026-03-28 14:23 by 唐沐儿
[考研] 复试调剂，一志愿南农083200食品科学与工程 +5 XQTJZ 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:49 by 狂炫麦当当
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭