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hezhihao_333

新虫 (初入文坛)


[交流] 关于菌落pcr

最近在做最基础的连接转化,每次转化后,氨苄板上也长菌,挑去单个菌落摇菌,做菌液pcr,出来的片段与目的片段大小有差别,我要的是1000bp左右的,但出来的却是700bp左右的,而且如果电泳时间长了的话,条带也没有了,各位帮帮忙,看看是什么情况?
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lillian菲

银虫 (小有名气)


★ ★
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小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-13 15:02:49
你好,请问你做的转化长菌,有没有涂X-gal和IPTG做蓝白斑筛选了吗?说不定你挑的是假阳性单菌落
还有PCR电泳时可换个比较指示性比较清楚的Marker,也有可能是电泳不准确的原因,可以送去测序看看,这个比较准确
6楼2012-08-11 15:31:28
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hzlatqh

银虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
电泳时间长了条带会不见?这是什么道理。。。
2楼2012-08-11 09:02:44
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damaomao

禁虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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3楼2012-08-11 09:04:52
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damaomao

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

4楼2012-08-11 09:05:45
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