应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于菌落pcr
131/1返回列表
查看: 1032  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

hezhihao_333

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于菌落pcr

最近在做最基础的连接转化，每次转化后，氨苄板上也长菌，挑去单个菌落摇菌，做菌液pcr，出来的片段与目的片段大小有差别，我要的是1000bp左右的，但出来的却是700bp左右的，而且如果电泳时间长了的话，条带也没有了，各位帮帮忙，看看是什么情况？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-08-10 23:35:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hzlatqh

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
电泳时间长了条带会不见？这是什么道理。。。
赞一下 回复此楼
2楼2012-08-11 09:02:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

damaomao

禁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
3楼2012-08-11 09:04:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

damaomao

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
4楼2012-08-11 09:05:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王贤卓

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hzlatqh at 2012-08-11 09:02:44
电泳时间长了条带会不见？这是什么道理。。。

pcr产物跑到底了。。
赞一下 回复此楼
5楼2012-08-11 10:34:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lillian菲

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-13 15:02:49
你好，请问你做的转化长菌，有没有涂X-gal和IPTG做蓝白斑筛选了吗？说不定你挑的是假阳性单菌落
还有PCR电泳时可换个比较指示性比较清楚的Marker，也有可能是电泳不准确的原因，可以送去测序看看，这个比较准确
赞一下 回复此楼
6楼2012-08-11 15:31:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hzlatqh

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 王贤卓 at 2012-08-11 10:34:15
pcr产物跑到底了。。...

这。。。随便一个东西跑久了也会跑出去的。。。原帖这样写会误导的。。。
赞一下 回复此楼
7楼2012-08-11 17:51:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zy晨曦

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
建议你改一下胶的浓度
赞一下 回复此楼
8楼2012-08-11 18:12:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sd3824289

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
700bp的片段用1%的凝胶就可以的！至于片段大小不对，我建议再挑选几个克隆看看！一般出现这种情况的概率不太大！
赞一下 回复此楼
10楼2012-08-12 08:44:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chicharito

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
把700bp的条带送去测序，看看是什么东西。
赞一下 回复此楼
11楼2012-08-12 17:02:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

angie8610

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可能是连接的片段不对吧，做PCR检测有一点不准确，建议做酶切！
赞一下 回复此楼
12楼2012-08-13 09:40:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sarah-miao

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你再酶切看看，能不能出现连接的两个条带呢，酶切最保险了
赞一下 回复此楼
13楼2012-08-13 10:18:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
zy晨曦9楼
2012-08-11 19:00   回复  
相关版块跳转 我要订阅楼主 hezhihao_333 的主题更新
131/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 函评 +3 布布和一二 2026-06-13 3/150 2026-06-13 23:35 by 芋圆香飘飘
[硕博家园] T^T +6 m584r2z4j3 2026-06-11 7/350 2026-06-13 23:10 by 3eaav2pea1
[公派出国] 囍 +4 q1zg6x4lf3 2026-06-12 4/200 2026-06-13 19:05 by 1js5n6upxm
[公派出国] T^T +5 q1zg6x4lf3 2026-06-12 5/250 2026-06-13 18:53 by lkmi35jdzt
[硕博家园] O(∩_∩)O +5 jk31rb6vyz 2026-06-12 7/350 2026-06-13 18:45 by lkmi35jdzt
[公派出国] π_π +4 m584r2z4j3 2026-06-11 4/200 2026-06-13 18:33 by lkmi35jdzt
[考研] T^T +6 m584r2z4j3 2026-06-11 6/300 2026-06-13 18:29 by lkmi35jdzt
[文学芳草园] 咸菜 +3 myrtle 2026-06-10 3/150 2026-06-13 18:29 by ahsoarli
[考研] o>_<o +5 m584r2z4j3 2026-06-11 5/250 2026-06-13 18:22 by lkmi35jdzt
[考博] T^T +3 q1zg6x4lf3 2026-06-12 3/150 2026-06-13 14:45 by 80j16ujcu8
[考研] O(∩_∩)O +3 q1zg6x4lf3 2026-06-12 4/200 2026-06-13 14:42 by 80j16ujcu8
[考博] T^T +4 jk31rb6vyz 2026-06-12 4/200 2026-06-13 12:09 by 80j16ujcu8
[找工作] 售SCI文章，我:8.O.5.51O.5.4,科目齐全,可十急 +4 q1zg6x4lf3 2026-06-12 4/200 2026-06-13 08:53 by t4hz8376wy
[考博] →_→ +3 q1zg6x4lf3 2026-06-12 3/150 2026-06-13 08:49 by t4hz8376wy
[找工作] *囍 +3 m584r2z4j3 2026-06-12 3/150 2026-06-13 08:29 by t4hz8376wy
[考博] [急招]吉林大学招收26年9月入学考核制博士生1名，截止今晚24点前 +3 hehejin 2026-06-10 4/200 2026-06-12 18:24 by 冻雨天
[基金申请] 前几天时间戳更新了 +8 vito刘 2026-06-11 13/650 2026-06-12 14:17 by BlakeReary
[教师之家] AASSDDFF +3 m584r2z4j3 2026-06-11 3/150 2026-06-12 11:28 by zs48m4lz8g
[考博] 还有课题组有博士名额吗 +5 冻雨天 2026-06-07 6/300 2026-06-08 20:59 by RCS_tyro
[考博] 博士申请 +3 张城斐 2026-06-07 3/150 2026-06-08 09:15 by A大朋同学
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭