24小时热门版块排行榜    

查看: 1401  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yqs129219

新虫 (小有名气)

[求助] 请问各位前辈们,这样的RNA电泳图能用于RT-PCR吗?

上样量是5ul的RNA和1ul的6Xloding Buffer  前面是DNA Marker2000,颜色淡的浓度是不是很低啊

4列为一个样



4列为一个样
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yqs129219

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 豆豆5273 at 2012-07-10 20:32:56
我觉得你是上样前未用枪头搅均匀吧,不然,同样的RNA应该是条带亮度一致的啊。。。从亮度来看,可以做反转,分成3管,1管 随机引物,1管特异性引物,1管oligo dT..后面做PCR的引物一定 要好好设计,最好找有经验的人 ...

二次PCR,重复第一次的么
7楼2012-07-11 10:56:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

shenye.judy

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+3, 鼓励发帖帮助解答问题。 2012-07-09 21:03:10
跑RNA时,还是先测量下OD值,然后加入等量的RNA(0.5-0.75ug),而不是加入等体积的,可比性不好。根据现在的图,看RNA完整度的话,还可以,勉强能用RT-PCR。当然如果做基因表达量比较的话,尽量用质量好的,一致的RNA。
2楼2012-07-09 19:46:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yqs129219

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by shenye.judy at 2012-07-09 19:46:29
跑RNA时,还是先测量下OD值,然后加入等量的RNA(0.5-0.75ug),而不是加入等体积的,可比性不好。根据现在的图,看RNA完整度的话,还可以,勉强能用RT-PCR。当然如果做基因表达量比较的话,尽量用质量好的,一致的 ...

测OD值也不一定准确的,根据Marker亮度来大致估算RNA浓度。这样可以吧。我是反转录用来做同源克隆的
3楼2012-07-09 20:44:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenye.judy

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-07-10 13:45:50
反转录用来做同源克隆,那就没那么严格了,你可以直接往下做试试。
另外,如果你提取的质量较好,且质量较一致的话,跑出来的条带亮度基本是一致的(等量的RNA)。
4楼2012-07-10 10:40:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 286求调剂 +10 Faune 2026-03-21 10/500 2026-03-21 23:34 by 314126402
[考研] 328求调剂,英语六级551,有科研经历 +5 生物工程调剂 2026-03-17 9/450 2026-03-21 23:32 by zhujy1982
[考研] 一志愿211,0703化学310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-21 22:21 by peike
[考研] 311求调剂 +13 冬十三 2026-03-15 14/700 2026-03-21 22:10 by peike
[考研] 考研调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-21 3/150 2026-03-21 20:04 by 无际的草原
[考研] 工科0856求调剂 +3 沐析汀汀 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:30 by 学员8dgXkO
[考研] 268求调剂 +9 简单点0 2026-03-17 9/450 2026-03-21 15:37 by lature00
[考研] 22 350 本科985求调剂,求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 301求调剂 +10 yy要上岸呀 2026-03-17 10/500 2026-03-21 03:14 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 Ma_xt 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:05 by JourneyLucky
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境专硕,总分308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:39 by JourneyLucky
[考研] 材料专业求调剂 +6 hanamiko 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:24 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕英一数二306 +7 z1z2z3879 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:48 by JourneyLucky
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 324求调剂 +5 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 5/250 2026-03-20 22:30 by 促天成
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 10/500 2026-03-19 14:31 by lemonzzn
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
信息提示
请填处理意见