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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » pET28a提取问题
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转基因猴子

木虫 (正式写手)

[求助] pET28a提取问题

pET28a试剂盒提取之后电泳检测发现在10000和8000bp左右有两条条带，感觉不对，各位知道是哪里出现问题了吗？
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我还年轻，我要上路！
1楼 2012-06-03 13:19:37
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回帖置顶 ( 共有1个 )

jiangjunjun

银虫 (小有名气)
转基因猴子: 回帖置顶 2012-06-04 18:13:53
质粒跑条带位置不能看出大小吧，直接做个酶切就好啦
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takeeasy
8楼2012-06-04 12:08:50
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普通回帖

viki_MDK

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 同感~ 2012-06-04 18:58:51
一条，两条，三条都正常，大胆的用吧，不放心的话单酶切看看。
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2楼2012-06-03 13:49:03
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转基因猴子

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by viki_MDK at 2012-06-03 13:49:03
一条，两条，三条都正常，大胆的用吧，不放心的话单酶切看看。

但是pET28a按理来说三条带也不是这个位置啊
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我还年轻，我要上路！
3楼2012-06-03 14:05:25
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caoluoyuan

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-04 18:59:01
质粒提起过程中存在三种形态，成螺旋、开环与线性，所以出现1-3条带都是正常的，pet28a空载体才5K多，重组的话另说。
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4楼2012-06-03 15:28:15
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
质粒由于构象的存在，marker对它的标记大小是不准确的，所以最好酶切后验证，这个结果才是可信的
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5楼2012-06-03 19:05:04
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转基因猴子

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by joan198108 at 2012-06-03 19:05:04
质粒由于构象的存在，marker对它的标记大小是不准确的，所以最好酶切后验证，这个结果才是可信的

这样啊，谢谢
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我还年轻，我要上路！
6楼2012-06-03 20:09:33
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niushuaiji

金虫 (正式写手)

不放弃的小鸟

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
问题解决的结果 期待中
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Tobeornottobe,that'saproblem
7楼2012-06-04 08:35:34
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转基因猴子

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by jiangjunjun at 2012-06-04 12:08:50
质粒跑条带位置不能看出大小吧，直接做个酶切就好啦

嗯，经过酶切回到了5K多一点的位置，应该是生工的试剂盒提取的时候出现问题，跑了那么大的带
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我还年轻，我要上路！
9楼2012-06-04 18:13:49
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kedaxiaoyu

木虫 (职业作家)

神虫浮云

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般都比较正常，但最好是通过酶切来验证。
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10楼2012-06-05 16:22:47
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