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转基因猴子

木虫 (正式写手)

[求助] pET28a提取问题

pET28a试剂盒提取之后电泳检测发现在10000和8000bp左右有两条条带,感觉不对,各位知道是哪里出现问题了吗?
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viki_MDK

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 同感~ 2012-06-04 18:58:51
一条,两条,三条都正常,大胆的用吧,不放心的话单酶切看看。
2楼2012-06-03 13:49:03
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转基因猴子

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by viki_MDK at 2012-06-03 13:49:03
一条,两条,三条都正常,大胆的用吧,不放心的话单酶切看看。

但是pET28a按理来说三条带也不是这个位置啊
我还年轻,我要上路!
3楼2012-06-03 14:05:25
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caoluoyuan

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-04 18:59:01
质粒提起过程中存在三种形态,成螺旋、开环与线性,所以出现1-3条带都是正常的,pet28a空载体才5K多,重组的话另说。
4楼2012-06-03 15:28:15
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
质粒由于构象的存在,marker对它的标记大小是不准确的,所以最好酶切后验证,这个结果才是可信的
5楼2012-06-03 19:05:04
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转基因猴子

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by joan198108 at 2012-06-03 19:05:04
质粒由于构象的存在,marker对它的标记大小是不准确的,所以最好酶切后验证,这个结果才是可信的

这样啊,谢谢
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6楼2012-06-03 20:09:33
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niushuaiji

金虫 (正式写手)

不放弃的小鸟

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
问题解决的结果 期待中
Tobeornottobe,that'saproblem
7楼2012-06-04 08:35:34
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jiangjunjun

银虫 (小有名气)

转基因猴子: 回帖置顶 2012-06-04 18:13:53
质粒跑条带位置不能看出大小吧,直接做个酶切就好啦
takeeasy
8楼2012-06-04 12:08:50
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转基因猴子

木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by jiangjunjun at 2012-06-04 12:08:50
质粒跑条带位置不能看出大小吧,直接做个酶切就好啦

嗯,经过酶切回到了5K多一点的位置,应该是生工的试剂盒提取的时候出现问题,跑了那么大的带
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9楼2012-06-04 18:13:49
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kedaxiaoyu

木虫 (职业作家)

神虫浮云

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般都比较正常,但最好是通过酶切来验证。
10楼2012-06-05 16:22:47
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