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da_da

金虫 (小有名气)

[求助] 请问PET28a抗性到底多少呀 Kan的浓度是多少啊

PET28a做载体 筛选阳性克隆 Kan的浓度到底是多少啊
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ygyly

新虫 (初入文坛)

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da_da: 金币+1 2012-06-19 11:15:11
我每次都是20ml培养基加20μl的Kan
2楼2012-06-18 11:47:39
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suifeng91

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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amisking: 金币+2, 鼓励发帖帮助解答问题。 2012-06-18 18:24:16
da_da: 金币+1 2012-06-19 11:15:25
卡那霉素(kanamycin) 常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。有时总担心抗性变大,所以我把推荐的30提高到50ug/ml。
人生不是一场物质的盛宴,而是一次灵魂的修炼,使它在谢幕之时比开幕之初更为高尚。
3楼2012-06-18 11:57:26
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jqq1985

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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da_da: 金币+1 2012-06-19 11:15:35
da_da: 金币+1 2012-06-19 11:21:19
我们的pET-28a 的kan工作浓度用的是50ug/ul
4楼2012-06-18 13:52:19
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jimjohntall

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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载体是在大肠杆菌里表达。我用的是kan50.
5楼2012-06-18 19:16:03
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aofeng860308

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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da_da: 金币+1 2012-06-19 11:15:46
da_da: 金币+1 2012-06-19 11:21:09
一般kan终浓度都是用的50ug/ml,当然有些书上也写用30ug/ml
6楼2012-06-18 19:27:24
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xuejunwang

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


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da_da: 金币+1 2012-06-19 11:21:59
大多数人kan终浓度都用50ug/ml
Neversaygoodbye
7楼2012-06-19 05:40:28
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mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)

蓝博士

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da_da: 金币+1 2012-06-20 08:25:35
20ml培养基加20μl kan 50应该是可以的。
蓝精灵
8楼2012-06-19 06:52:57
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sayaya

铁杆木虫 (正式写手)

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da_da: 金币+2 2012-06-20 08:25:45
卡那霉素(kanamycin) 常配置成 50 mg/ml 的贮液,工作浓度为10ug/ml~50ug/ml。实践中,一般都是取高限,所以,大肠杆菌培养时一般每ml 培养基中加入 1 ul Kan50贮液。
9楼2012-06-20 07:42:18
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lei5198

金虫 (初入文坛)

lei5198

液体添加50ug/mL,固体最好100lug/mL。已做过了。
凡事都怕认真
10楼2012-06-20 09:10:40
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