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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 关于内标法测样品浓度的问题
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xiaobolala

新虫 (小有名气)

[求助] 关于内标法测样品浓度的问题

关于内标法测得样品中所求物质的浓度，我之前的理解是内标物s和样品i，（Ai/As)样品/(Ai/As)标准=（Ci%)样品/(Ci%)标准，画出了标准曲线，就可以知道未知样品的浓度了。
但是我现在在配置溶液中有些疑惑。1.内标物是加入样品中一起稀释后进样；2.内标物单独配置成已知浓度的溶液，再加入已知浓度的样品中，但是这样的话，两种物质一混合，原先的各自的浓度都发生了变化，那计算时，是否就要重新计算各自浓度后再代入公式计算？这样就比较麻烦了吧~但是我看其他论文，感觉他们都是单独配置了一定浓度的内标液的。
  那是用哪种方法比较好呢？
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1楼 2012-05-17 08:38:46
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

猪猪石头

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
内标法：我们的操作步骤是保持内标物浓度不变的，一般是样品稀释定量，之后统一加入一定量的内标物！
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爱我吧，猪猪！
4楼2012-05-17 12:13:46
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普通回帖

xiaobolala

新虫 (小有名气)
还有浓度的变化，是将内标物的浓度呈梯形变化，然后保正样品的浓度不变；还是将样品浓度梯形变化，保证内标物浓度不变？
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2楼2012-05-17 08:42:56
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xxaijwd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo: 金币+2, 感谢应助 好久不见 ^^ 2012-05-21 10:56:28
408851978: 金币+1 2012-05-21 20:07:08
一般内标法会保证内标浓度保持同一水平，变化样品浓度来做标准曲线，最后通过标准曲线计算样品浓度的。你上面给出的公式相当于标准曲线法的简化了。看你的两种方法我没太明白，我感觉都要重新计算浓度再计算啊。
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3楼2012-05-17 11:39:59
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xiaobolala

新虫 (小有名气)
★
408851978: 金币+1 2012-05-21 20:07:34
引用回帖:
3楼: Originally posted by xxaijwd at 2012-05-17 11:39:59:
一般内标法会保证内标浓度保持同一水平，变化样品浓度来做标准曲线，最后通过标准曲线计算样品浓度的。你上面给出的公式相当于标准曲线法的简化了。看你的两种方法我没太明白，我感觉都要重新计算浓度再计算啊。

上面的两种方法我是配溶液时想到的；1.将内标和样品去一定量后混合，再共同稀释，比如5μL的乙醛和5μl的甲醛混合后，稀释到100ML；假如甲醛为内标的话，后面的样就是10μL的乙醛和5μl的甲醛混合，再稀释到100ML，之后是15和5，,20和5……以此类推；2.单独配置5μL/L的甲醛溶液，再配置5μL.L，10μL/L……的乙醛溶液，再给自取一定量混合，这样的话混合溶液中甲醛含量就不在是5μL/L了，乙醛也不是5,10,15μL/L了，这样乙醛，甲醛的浓度要再重新计算后，才能代到上面的公式中去吧？
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5楼2012-05-18 09:02:59
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xbqewpq

荣誉版主 (著名写手)

魂兮

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议你还是将样品和内标液都配制储备液，然后在同一瓶中同时稀释，这样浓度不会错了。
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红颜远，相思苦，几番意，难相付。十年情思百年渡，不斩相思不忍顾！
6楼2012-05-18 10:30:09
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xxaijwd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
soundhorizo: 金币+2, 鼓励讨论 ^^ 辛苦拉~ 2012-05-21 10:56:55
引用回帖:
5楼: Originally posted by xiaobolala at 2012-05-18 09:02:59:
上面的两种方法我是配溶液时想到的；1.将内标和样品去一定量后混合，再共同稀释，比如5μL的乙醛和5μl的甲醛混合后，稀释到100ML；假如甲醛为内标的话，后面的样就是10μL的乙醛和5μl的甲醛混合，再稀释到100M ...

不好意思，这几天没上小木虫……我一般是按照第一种方法做的，但是这样公式中C就要变成m了。因为虽然稀释到相同的体积，但乙醛加的量不一样嘛。下面的方法原则上也可以，不过同样需要体积折算。
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7楼2012-05-21 09:43:35
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liangliang88

至尊木虫 (著名写手)

月球来的亮

【答案】应助回帖

我总觉得外标更准确一点，个人建议，还是外表做一下看结果，做个对比哦！纯属个人观点！
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http://yjsc.jsu.edu.cn/
8楼2012-05-21 15:45:13
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xiaobolala

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by xxaijwd at 2012-05-21 09:43:35:
不好意思，这几天没上小木虫……我一般是按照第一种方法做的，但是这样公式中C就要变成m了。因为虽然稀释到相同的体积，但乙醛加的量不一样嘛。下面的方法原则上也可以，不过同样需要体积折算。

公式中的C一定要变为M么，因为是μL，我可以近似的看成μg么？那这样不直接变为了单位μg/l，就是浓度单位了~
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9楼2012-05-22 07:57:50
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xiaobolala

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by xxaijwd at 2012-05-21 09:43:35:
不好意思，这几天没上小木虫……我一般是按照第一种方法做的，但是这样公式中C就要变成m了。因为虽然稀释到相同的体积，但乙醛加的量不一样嘛。下面的方法原则上也可以，不过同样需要体积折算。

因为加入要换算成M的话，还要知道两种物质的密度，我现在不知道他们的密度啊~
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10楼2012-05-22 07:59:12
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