应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR后电泳是特异性条带，但测序总是出现结合问题。怎么办？
101/1返回列表
查看: 2049  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

anglemanfred

银虫 (正式写手)

[求助] PCR后电泳是特异性条带，但测序总是出现结合问题。怎么办？

很是焦急！已经做了好几次了。请各位虫友帮帮忙！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-03-01 17:36:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

137167741

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
anglemanfred(金币+2): ★★★很有帮助 2012-03-05 12:34:04
第一序列多长？
第二、可以考虑克隆测序，这样不容易产生结合。
赞一下 回复此楼
总有一天我要修改用户名。
2楼2012-03-01 18:58:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cindybrella

铁杆木虫 (知名作家)

魔女
帮顶!我也不懂~~哎
赞一下 回复此楼
请给我勇气和力量，让我自由的翱翔~~
3楼2012-03-01 20:35:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiaxinfish

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
anglemanfred(金币+1): ★有帮助 2012-03-05 12:34:58
b保险点的话还是做个TAclone再测序，如果不想做TA，就用2个PCR引物直接测序，总会成功一个的吧
赞一下 回复此楼
4楼2012-03-01 21:52:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
anglemanfred(金币+1): 谢谢！ 2012-03-02 23:42:22
换个测序公司试一下，有的公司就是克隆在载体上也测不出来！
赞一下 回复此楼
jiayoubashaonian
5楼2012-03-01 22:49:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ZOEY21

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
anglemanfred(金币+3): 学习啦！ 2012-03-02 23:41:49
我的PCR产物电泳很好，测序也是结合问题。测序公司反馈说是产物不纯，或者引物特异性不好。你可以考虑重新优化反应体系（不过看来你是不做这步了），或者把目的片段序列告诉测序公司，他们会设计中间引物安排测序。
赞一下 回复此楼
6楼2012-03-02 10:33:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anglemanfred

银虫 (正式写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by 137167741 at 2012-03-01 18:58:25:
第一序列多长？
第二、可以考虑克隆测序，这样不容易产生结合。

一个是843，一个是947bp。
赞一下 回复此楼
7楼2012-03-05 12:33:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anglemanfred

银虫 (正式写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by cindybrella at 2012-03-01 20:35:04:
帮顶!我也不懂~~哎

嘿嘿嘿。
回复此楼
8楼2012-03-05 12:33:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chubing

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以自己克隆转菌测序或者请生物公司转菌测序。1000bp以下是可以转的，这样应该没有问题，就可以测出来了。
赞一下 回复此楼
9楼2012-03-05 14:49:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

跳跳鱼

木虫 (著名写手)
学习 了
回复此楼
快乐奋斗，创造所有。
10楼2012-03-12 20:34:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 anglemanfred 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林，给自己招师弟中～ +3 TqlXswl 2026-03-16 6/300 2026-03-17 13:44 by 学海漂泊
[考研] 271求调剂 +12 生如夏花… 2026-03-11 14/700 2026-03-17 10:56 by lovewei0727
[考研] 化学工程321分求调剂 +10 大米饭！ 2026-03-15 13/650 2026-03-17 06:57 by laoshidan
[文学芳草园] 伙伴们，祝我生日快乐吧 +17 myrtle 2026-03-10 26/1300 2026-03-16 18:32 by 青橙Ln
[考研] 311求调剂 +5 26研0 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:21 by a不易
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +13 enenenhui 2026-03-13 14/700 2026-03-16 15:19 by 了了了了。。
[考研] 344求调剂 +3 knight344 2026-03-16 3/150 2026-03-16 09:42 by 无际的草原
[考研] 326求调剂 +4 上岸的小葡 2026-03-15 5/250 2026-03-16 08:39 by Linda Hu
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 341求调剂 +4 番茄头--- 2026-03-10 4/200 2026-03-13 23:12 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工085600调剂求老师收留 +9 jiaanl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 20:22 by JourneyLucky
[考研] 301求调剂 +6 Liyouyumairs 2026-03-11 6/300 2026-03-13 20:11 by JourneyLucky
[考研] 【0856】化学工程（085602）313 分，本科学科评估A类院校化学工程与工艺，诚求调剂 +7 小刘快快上岸 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:06 by ruiyingmiao
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +8 困于星晨 2026-03-12 10/500 2026-03-13 15:42 by ms629
[考研] 求调剂 +3 程雨杭 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:06 by JourneyLucky
[考研] 材料301分求调剂 +5 Liyouyumairs 2026-03-12 5/250 2026-03-13 14:42 by JourneyLucky
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
[考研] 化工学硕306求调剂 +9 42838695 2026-03-12 9/450 2026-03-13 10:16 by houyaoxu
[考博] 福州大学杨黄浩课题组招收2026年专业学位博士研究生，2026.03.20截止 +3 Xiangyu_ou 2026-03-12 3/150 2026-03-13 09:36 by duanwu655
[考研] 298求调剂 +3 Vv呀！ 2026-03-10 3/150 2026-03-10 22:40 by 剑诗杜康
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭