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求助!关于RT-PCR的问题!
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xuzhu598
铁虫
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虫号: 1309747
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性别: GG
专业: 肿瘤免疫
[
求助
]
求助!关于RT-PCR的问题!
最近在做关于反转录PCR,想请教几个问题:
1.如何确定RNA反转录是否成功?(是否可以跑下琼脂糖电泳)
2.我反转录之后的PCR中,电泳结果什么也没有,就连内参引物也没有扩出来,不知是什么原因?
我反转录用的是takara的PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit,之后的PCR用的是Pyrobest® DNA Polymerase!
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1楼
2011-11-07 17:01:04
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专业: 生物化学
【答案】应助回帖
xuzhu598(金币+2): 2011-11-13 21:11:07
我们一般内参都没跑出来的,,会自动放弃该反转录产物的。 貌似反转录产物最基本的就是要跑出内参吧, 你RNA提得怎样? 如果RNA还可以,建议再RT一次吧。
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7楼
2011-11-08 09:59:16
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