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dongfangzz管理员
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[交流]
【求助/交流】PCR之后的产物与设计引物时产物的大小不符？ 已有5人参与
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我要做实时荧光定量PCR，提取的RNA逆转录之后，以cDNA为模板PCR（引物是以mRNA序列设计的）。 PCR之后的产物跑电泳时与设计引物时产物的大小不符。设计引物时产物应为170bp, 而实际产物为200多个bp。 这是怎么回事？ marker为DL1000DNA，共7个带（100、200、300、400、500、700、1000）  连接看不到，再来一个。 http://g.zhubajie.com/urllink.php?id=98985479lxqhk563rrgo7vt 不知是不是和RNA降解有关系? 先谢谢大家了! [ Last edited by dongfangzz on 2010-9-14 at 23:44 ] |
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4楼2010-09-11 19:39:48
2楼2010-09-11 16:50:27
dongfangzz
版主
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 531.6
- 散金: 16
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- 帖子: 206
- 在线: 83.4小时
- 虫号: 890108
- 注册: 2009-11-01
- 性别: GG
- 专业: 医学
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我不知道呀，公司用primer3.0给设计的。设计后直接把文本文档给发过来了，让我比对。里面信息挺全的,。有一项说product size: 170. 部分原文件： ADDITIONAL OLIGOS start len tm gc% any 3' seq 2 LEFT PRIMER 184 20 60.11 55.00 2.00 1.00 gaccctgccttaccaactca RIGHT PRIMER 353 20 61.55 60.00 5.00 0.00 cactgtggagacgcccatac PRODUCT SIZE: 170, PAIR ANY COMPL: 3.00, PAIR 3' COMPL: 0.00 |
3楼2010-09-11 17:02:57
5楼2010-09-12 09:55:04
