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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】pcr产物回收问题
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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biowang

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】pcr产物回收问题

我的引物是54bp的,引物互为模板,pcr产物为89bp,pcr产物较亮,现在要纯化回收,是直接用pcr产物纯化试剂盒呢,还是切胶后用胶回收试剂盒回收?
我前面用国产的试剂盒切胶回收了,但是看不到条带. 请各位指点一下,用什么方法回收,用哪个牌子的试剂盒比较好? 谢谢了
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1楼 2010-08-15 17:07:09
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xp198766

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫职业打酱油滴~~！
biowang(金币+1): 2010-08-15 21:01:08
biowang(金币+1): 2010-08-16 22:14:18
我没有纯化过这么短的序列，最短的好像也有100多，我一般用两种试剂盒纯化过程中会先加一点异丙醇，再洗脱，不知道适不适合你……
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2楼2010-08-15 20:55:53
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寂寞之巅

铁虫 (小有名气)
国产试剂盒 里面 我们实验室 喜欢用东盛公司的 回收效率比较高
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好好学习，天天向上
3楼2010-08-16 08:33:26
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
吸附柱对小片段的吸附能力很差，用醇沉淀吧
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4楼2010-08-16 08:40:40
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coral717

新虫 (初入文坛)
89bp，54bp，相差不大
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5楼2010-08-16 09:03:52
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xiaoru2010

引用回帖:
Originally posted by biowang at 2010-08-15 17:07:09:
我的引物是54bp的,引物互为模板,pcr产物为89bp,pcr产物较亮,现在要纯化回收,是直接用pcr产物纯化试剂盒呢,还是切胶后用胶回收试剂盒回收?
我前面用国产的试剂盒切胶回收了,但是看不到条带. 请各位指点一下,用什么 ...

貌似100以下的小片段有专门的试剂盒，一般的估计不行
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6楼2010-08-16 09:03:56
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biowang

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 寂寞之巅 at 2010-08-16 08:33:26:
国产试剂盒 里面 我们实验室 喜欢用东盛公司的 回收效率比较高

许多杂质也会与核酸一起被醇沉淀下来吧?
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7楼2010-08-16 18:06:07
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sweetycatsjh

新虫 (初入文坛)
biowang(金币+1): 2010-08-21 10:56:53
如果你条带很特异可以直接用重沉法试试  我自己做过100bp的片段回收  效果不错 做转化也可以
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8楼2010-08-16 23:01:37
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一笑35

铁虫 (初入文坛)
biowang(金币+1): 2010-08-21 10:56:57
我做过200bp的切胶回收，MEGAR试剂盒子回收率相对较高些，不防试试。
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努力学习，充实自己！
9楼2010-08-17 08:31:56
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空谷幽风

金虫 (正式写手)
biowang(金币+1): 2010-08-21 10:56:36
不用割胶回收，直接用试剂盒回收，并且加适量的异丙醇
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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
10楼2010-08-18 12:33:48
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