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维纳斯的骑士

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】我挑的INVSC1菌为什么有絮凝状物质啊? 已有2人参与

我把克隆好的pYES2质粒转化进INVSC1菌株里,长出来的转化子菌落PCR验证后挑到正确的转化子,然后再接到试管里摇菌,长出来后发现有絮凝状物质,收菌后再做菌落PCR验证就发现没有之前验证的目的基因条带了,很苦恼,恳请大家给些建议啊,谢谢
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

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amisking(金币+1):good! 2010-06-13 17:46:57
你用pyes2.表达什么啊,我也用着;
是转速太低了还是染菌了,不会成絮状啊,我以前还鉴定来,但是怎么鉴定都鉴定不出来,最后直接做诱导表达,都能诱导出来,再后来直接不验证了;
你是表达什么基因啊。。。。。。
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
2楼2010-06-13 17:00:35
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维纳斯的骑士

金虫 (小有名气)

我表达一个蛋白酶基因,你的转化子菌落几天长出来啊?诱导表达后表达量如何啊?
3楼2010-06-15 08:45:04
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

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引用回帖:
Originally posted by 维纳斯的骑士 at 2010-06-15 08:45:04:
我表达一个蛋白酶基因,你的转化子菌落几天长出来啊?诱导表达后表达量如何啊?

我的两天就能长出来,我一般让平板长3-4天左右吧。我是验证基因功能的,定性没有定过量。。。
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
4楼2010-06-17 10:20:50
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维纳斯的骑士

金虫 (小有名气)

哦,我的也是差不多这么长时间,看来是染菌了
5楼2010-06-17 11:36:07
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